精英家教網(wǎng)苦馬豆素(SW)最早是從植物灰苦馬豆中分離獲得,SW是否具有抑制腫瘤細(xì)胞生長的作用?許多學(xué)者做了大量研究,請根據(jù)以下實驗研究流程及研究結(jié)構(gòu)回答問題.
取小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞

制成單細(xì)胞懸液,接種于多孔板,加入等量培養(yǎng)液,每組設(shè)5個平行孔

于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)24h后靜置去除上清液

加入等量不同濃度SW溶液,于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)

分別在24h、48h、72h時吸取培養(yǎng)液,觀察結(jié)果,得到不同濃度SW對細(xì)胞存活率影響曲線(如圖)

將培養(yǎng)48h的培養(yǎng)液離心,細(xì)胞染色,在熒光顯微鏡下觀察拍照,記錄正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞數(shù)目,并采用免疫熒光細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2表達(dá)量狀況,匯總統(tǒng)計結(jié)果(如表).
如表培養(yǎng)48h細(xì)胞數(shù)目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達(dá)量情況.

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    1. SW 癌細(xì)胞數(shù)目 凋亡細(xì)胞數(shù)目 Bax蛋白 Bcl-2蛋白
       2微克/ml + ++++ ++++ +
       1微克/ml ++ +++ +++ ++
      0.5微克/ml +++ ++ ++ +++
      0微克/ml ++++ + + ++++注:“+”的數(shù)量表示相對值的大小
      (1)實驗中首先將小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液,于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的目的是
       

      (2)處于間期的肝癌Hepal-6細(xì)胞分子水平的主要變化是
       

      (3)實驗中對照組的處理方法應(yīng)為
       
      ,利用多孔板培養(yǎng)時,每組設(shè)置5個平行孔同時進(jìn)行培養(yǎng),計數(shù)后統(tǒng)計平均值是為了
       

      (4)分析圖中曲線可知,SW對肝癌Hepal-6細(xì)胞作用效果的特點是①
       
      ,②
       

      (5)表1結(jié)果說明SW可以誘發(fā)細(xì)胞
       
      ,從分子水平上分析,SW可以導(dǎo)致癌細(xì)胞內(nèi)
       
      的合成量增加,寫出與此相關(guān)的遺傳信息傳遞的具體過程
       
      分析:分析表格:隨著SW濃度的增加,癌變的細(xì)胞減少,凋亡的細(xì)胞增多,可以得出SW可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;同時,可以看出Bax蛋白隨著SW濃度增加而增加,Bcl-2蛋白著SW濃度增加而減少.
      分析曲線圖:SW濃度越高,對細(xì)胞生長(存活)的抑制作用越強(qiáng);SW作用時間越長,對細(xì)胞生長(存活)的抑制作用越強(qiáng).
      解答:解:(1)動物細(xì)胞培養(yǎng),制成單個細(xì)胞,防止接觸抑制,給予適宜的環(huán)境,使細(xì)胞克隆(細(xì)胞分裂、細(xì)胞增殖),為科研提供足夠的材料. (2)處于間期的肝癌Hepal-6細(xì)胞分子水平的主要變化是DNA復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成. 
      (3)空白對照,不加SW,多組測量為減小誤差使實驗結(jié)果更可信.
      (4)相同作用時間,不同SW濃度對小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞有抑制,且隨著SW濃度增加,抑制作用增強(qiáng);同一SW濃度,不同作用時間對對小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞有抑制,且隨著SW作用時間增加,抑制作用增強(qiáng).
      (5)分析曲線圖可知:SW濃度越高,對細(xì)胞生長(存活)的抑制作用越強(qiáng);SW作用時間越長,對細(xì)胞生長(存活)的抑制作用越強(qiáng).Bax基因表達(dá)的過程可以表示為Bax基因轉(zhuǎn)錄形成mRNA,mRNA翻譯成Bax蛋白,如圖:精英家教網(wǎng)
      故答案:(1)細(xì)胞增殖(細(xì)胞分裂、細(xì)胞克隆)
      (2)DNA復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成
      (3)不加SW藥物處理,加等量培養(yǎng)液(或只加等量培養(yǎng)液)  減小誤差使實驗結(jié)果更可信
      (4)①SW濃度越高,對細(xì)胞生長(存活)的抑制作用越強(qiáng)
      ②(SW)作用時間越長,對細(xì)胞生長(存活)的抑制作用越強(qiáng)
      (5)凋亡  Bax蛋白  Bax蛋白基因
      轉(zhuǎn)錄
      mRNA
      翻譯
      Bax蛋白
      點評:本題結(jié)合圖表,考查動物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆,意在考查考生具有對一些生物學(xué)問題進(jìn)行初步探究的能力,具備驗證簡單生物學(xué)事實的能力,并能對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理.
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