精英家教網(wǎng)苦馬豆素(SW)最早是從植物灰苦馬豆中分離獲得,SW是否具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用?許多學(xué)者做了大量研究,請(qǐng)根據(jù)以下實(shí)驗(yàn)研究流程及研究結(jié)構(gòu)回答問題.
取小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞

制成單細(xì)胞懸液,接種于多孔板,加入等量培養(yǎng)液,每組設(shè)5個(gè)平行孔

于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)24h后靜置去除上清液

加入等量不同濃度SW溶液,于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)

分別在24h、48h、72h時(shí)吸取培養(yǎng)液,觀察結(jié)果,得到不同濃度SW對(duì)細(xì)胞存活率影響曲線(如圖)

將培養(yǎng)48h的培養(yǎng)液離心,細(xì)胞染色,在熒光顯微鏡下觀察拍照,記錄正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞數(shù)目,并采用免疫熒光細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2表達(dá)量狀況,匯總統(tǒng)計(jì)結(jié)果(如表).
如表培養(yǎng)48h細(xì)胞數(shù)目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達(dá)量情況.
  • SW 癌細(xì)胞數(shù)目 凋亡細(xì)胞數(shù)目 Bax蛋白 Bcl-2蛋白
     2微克/ml + ++++ ++++ +
     1微克/ml ++ +++ +++ ++
    0.5微克/ml +++ ++ ++ +++
    0微克/ml ++++ + + ++++注:“+”的數(shù)量表示相對(duì)值的大小
    (1)實(shí)驗(yàn)中首先將小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液,于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的目的是
     

    (2)處于間期的肝癌Hepal-6細(xì)胞分子水平的主要變化是
     

    (3)實(shí)驗(yàn)中對(duì)照組的處理方法應(yīng)為
     
    ,利用多孔板培養(yǎng)時(shí),每組設(shè)置5個(gè)平行孔同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng),計(jì)數(shù)后統(tǒng)計(jì)平均值是為了
     

    (4)分析圖中曲線可知,SW對(duì)肝癌Hepal-6細(xì)胞作用效果的特點(diǎn)是①
     
    ,②
     

    (5)表1結(jié)果說明SW可以誘發(fā)細(xì)胞
     
    ,從分子水平上分析,SW可以導(dǎo)致癌細(xì)胞內(nèi)
     
    的合成量增加,寫出與此相關(guān)的遺傳信息傳遞的具體過程
     
    分析:分析表格:隨著SW濃度的增加,癌變的細(xì)胞減少,凋亡的細(xì)胞增多,可以得出SW可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;同時(shí),可以看出Bax蛋白隨著SW濃度增加而增加,Bcl-2蛋白著SW濃度增加而減少.
    分析曲線圖:SW濃度越高,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)(存活)的抑制作用越強(qiáng);SW作用時(shí)間越長(zhǎng),對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)(存活)的抑制作用越強(qiáng).
    解答:解:(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),制成單個(gè)細(xì)胞,防止接觸抑制,給予適宜的環(huán)境,使細(xì)胞克。(xì)胞分裂、細(xì)胞增殖),為科研提供足夠的材料. (2)處于間期的肝癌Hepal-6細(xì)胞分子水平的主要變化是DNA復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成. 
    (3)空白對(duì)照,不加SW,多組測(cè)量為減小誤差使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可信.
    (4)相同作用時(shí)間,不同SW濃度對(duì)小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞有抑制,且隨著SW濃度增加,抑制作用增強(qiáng);同一SW濃度,不同作用時(shí)間對(duì)對(duì)小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞有抑制,且隨著SW作用時(shí)間增加,抑制作用增強(qiáng).
    (5)分析曲線圖可知:SW濃度越高,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)(存活)的抑制作用越強(qiáng);SW作用時(shí)間越長(zhǎng),對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)(存活)的抑制作用越強(qiáng).Bax基因表達(dá)的過程可以表示為Bax基因轉(zhuǎn)錄形成mRNA,mRNA翻譯成Bax蛋白,如圖:精英家教網(wǎng)
    故答案:(1)細(xì)胞增殖(細(xì)胞分裂、細(xì)胞克。
    (2)DNA復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成
    (3)不加SW藥物處理,加等量培養(yǎng)液(或只加等量培養(yǎng)液)  減小誤差使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可信
    (4)①SW濃度越高,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)(存活)的抑制作用越強(qiáng)
    ②(SW)作用時(shí)間越長(zhǎng),對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)(存活)的抑制作用越強(qiáng)
    (5)凋亡  Bax蛋白  Bax蛋白基因
    轉(zhuǎn)錄
    mRNA
    翻譯
    Bax蛋白
    點(diǎn)評(píng):本題結(jié)合圖表,考查動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆,意在考查考生具有對(duì)一些生物學(xué)問題進(jìn)行初步探究的能力,具備驗(yàn)證簡(jiǎn)單生物學(xué)事實(shí)的能力,并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理.
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