Question

11．干擾素是動物或人體細胞受病毒感染后產(chǎn)生的一類糖蛋白，具有抗病毒、抑制腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性．回答下列問題：
（1）干擾素的作用機理是：干擾素作用于宿主細胞膜上的相應(yīng)受體，激活該細胞核中基因表達產(chǎn)生多種抗病毒蛋白，其中有些蛋白可通過激活RNA酶使病毒的RNA水解，有些則可與核糖體（細胞器）結(jié)合，通過抑制病毒多肽鏈的合成發(fā)揮抗病毒作用．干擾素還可以通過提高吞噬細胞將抗原呈遞給T細胞的能力，抑制腫瘤細胞．
（2）干擾素的獲取方法是：從白細胞中獲取RNA，通過逆轉(zhuǎn)錄的過程獲得干擾素基因，利用DNA連接酶將干擾素基因與牛乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件連接在一起構(gòu)建基因表達載體，采用顯微注射的方法導入牛的受精卵細胞中，經(jīng)胚胎早期培養(yǎng)一段時間后，移植入母體內(nèi)發(fā)育成熟，即可獲得能產(chǎn)生干擾素的轉(zhuǎn)基因牛．
（3）干擾素基因?qū)�入受體細胞后，欲檢測其是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，采用的方法是分子雜交．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）RNA酶的作用是水解RNA；多肽的合成場所是核糖體，因此有些蛋白質(zhì)可與核糖體結(jié)合，通過抑制病毒多肽鏈的合成發(fā)揮抗病毒作用；在特異性免疫中，吞噬細胞將抗原處理后呈遞給T細胞．
（2）從白細胞中獲取RNA，通過反轉(zhuǎn)錄過程獲得干擾素基因．基因工程中構(gòu)建基因表達載體時，需采用DNA連接酶將目的基因和載體連接形成重組質(zhì)粒．基因表達載體由啟動子、標記基因、目的基因和終止子組成，其中啟動子是RNA聚合酶識別與結(jié)合的部位．要將基因表達載體導入動物細胞體內(nèi)，采用的方法是顯微注射法，采用的受體細胞是動物的受精卵，因為受精卵的全能性最高．
（3）干擾素基因?qū)�入受體細胞后，欲檢測其是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，可采用分子雜交技術(shù)，即用標記的目的基因作探針與mRNA雜交．
故答案為：
（1）RNA酶  核糖體    T
（2）逆轉(zhuǎn)錄  DNA連接      顯微注射   受精卵
（3）分子雜交

點評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合所學的知識準確答題．