下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點。
下圖是轉基因抗病香蕉的培育過程,含目的基因的外源DNA和質粒上的箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答下列問題:
(1) 用圖中的質粒和目的基因構建重組質粒,不能使用SmaI酶切割,原因是__________________________________________。
(2) 構建含目的基因的重組質粒A時,選 用 BamhHI 和HindⅢ酶對_______和 _______進行切割,可以防止質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化。
(3) ①??⑤中存在堿基互補配對的是____________。
(4) 香蕉組織細胞具有__________,因此,可以利用組織培養(yǎng)技術將導入目的(抗病)基因的香蕉組織細胞培育成植株。圖中④、⑤依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的_________、____________。培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除添加營養(yǎng)物質外,還需要添加_________和__________以誘導外植體完成④、⑤生理過程,培養(yǎng)成完整的植物體。在形成愈傷組織的過程中,細胞的新陳代謝類型是_____________。
(5) 如何檢測圖示過程最終是否取得成功?____________________________。
(1)SmaI酶會破壞質粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因(2分) (2)外源DNA和質粒(2分) (3)①④⑤ (2分) (4)全能性 脫分化 再分化 生長素 細胞分裂素 異養(yǎng)需氧型(2分) (5)用蟲子感染轉基因香蕉,觀察是否抗蟲(2分)
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