Question

興趣小組在學(xué)習(xí)完“蛋白質(zhì)的提取和分離”后，聯(lián)系相關(guān)實(shí)驗(yàn)，準(zhǔn)備從豬肝臟研磨液中初步提取過(guò)氧化氫酶，設(shè)計(jì)的“過(guò)氧化氫酶提取、分離流程圖”如下：

試回答下列有關(guān)問(wèn)題：

(1)向肝細(xì)胞懸液中加入一定量的pH＝7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢�，可以破碎肝�?xì)胞，破碎細(xì)胞的原理是__________。與使用蒸餾水相比，使用緩沖液的優(yōu)點(diǎn)是______。

(2)蛋白質(zhì)粗分離階段透析的目的是________。

(3)電泳利用了待分離樣品中各種分子的________等的差異，而產(chǎn)生不同遷移速度，實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。

(4)實(shí)驗(yàn)小組以3%過(guò)氧化氫溶液和獲得的過(guò)氧化氫酶為材料進(jìn)行溫度對(duì)酶催化活性影響的探究，得到如圖所示的結(jié)果，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出“過(guò)氧化氫酶能耐受100 ℃高溫”的結(jié)論，請(qǐng)問(wèn)這一結(jié)論是否可靠？為什么？________。

 

Answer 1

(1)滲透原理(當(dāng)外界溶液濃度低于動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)液濃度時(shí)，細(xì)胞吸水漲破)　可以保證酶溶液pH基本穩(wěn)定，避免因pH變化影響過(guò)氧化氫酶活性

(2)除去小分子化合物(雜質(zhì))

(3)帶電性質(zhì)、分子大小、形狀(答對(duì)兩項(xiàng)得分)

(4)不可靠，高溫也能使過(guò)氧化氫分解

 

(1)酶的活性受酸堿度、溫度等條件的影響。使用緩沖溶液可達(dá)到細(xì)胞因吸水而漲破的目的，又不會(huì)因溶液酸堿度不適宜而影響酶的活性。(2)透析去除分子量較小的雜質(zhì)，即樣品的粗分離。(3)電泳技術(shù)就是在電場(chǎng)的作用下，利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而達(dá)到對(duì)樣品進(jìn)行分離、鑒定或提純的目的。(5)在該實(shí)驗(yàn)中溫度應(yīng)是實(shí)驗(yàn)變量，所以為了確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，應(yīng)該排除其他的能導(dǎo)致過(guò)氧化氫分解的因素。