Question

我們?nèi)粘３缘拇竺字需F含量極低，科研人員通過基因工程等技術(shù)，培育出了鐵含量比普通大米高60%的轉(zhuǎn)基因水稻，改良了稻米的營養(yǎng)品質(zhì)。下圖為培育轉(zhuǎn)基因水稻流程示意圖，請回答下列問題：

(l)鐵結(jié)合蛋白基因來自菜豆，且基因的脫氧核苷酸序列已知，可以用              法獲得此目的基因。

(2)構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時，通常要用              分別切割               和                    。

(3)將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時，通過培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得                。

(4)為研究外源基因的遺傳方式，將T。代植株上收獲的種子種植成T₁，代株系，檢測各單株的潮霉素抗性。在檢測的多數(shù)T₁代株系內(nèi)，抗潮霉素植株與潮霉素敏感植株的比例為3：1，此結(jié)果說明外源基因的遺傳符合              定律。有少數(shù)T₁代株系的所有植株都表現(xiàn)為對潮霉素敏感，但其體內(nèi)能檢測到鐵結(jié)合蛋白基因，造成這一結(jié)果最可能的原因是             。

 

Answer 1

【答案】

（1）化學(xué)合成      （2）限制性核酸內(nèi)切酶      含目的基因的DNA片段     質(zhì)粒     （3）含有重組質(zhì)粒（有潮霉素抗性）的愈傷組織       （4）基因分離    潮霉素抗性基因沒有表達（或“潮霉素抗性基因丟失”）（2分）

【解析】

試題分析：(l)獲取目的基因的方法有三種：①從基因文庫中獲取  ②利用PCR技術(shù)擴增  ③人工合成（化學(xué)合成）。如果基因的脫氧核苷酸序列已知，可以用化學(xué)合成法獲得此目的基因。

(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程中，通常要用同一種限制酶分別切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，是它們產(chǎn)生相同的黏性末端，然后再用DNA連接酶連接成重組質(zhì)粒。

(3)質(zhì)粒上的標(biāo)記基因為潮霉素抗性基因，因此通過培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得含有重組質(zhì)粒的愈傷組織。

(4)細胞導(dǎo)入目的基因后，可將該細胞認(rèn)為是攜帶目的基因的雜合子，自交后代中，抗潮霉素植株與潮霉素敏感植株的比例為3：1，此結(jié)果說明外源基因的遺傳符合基因的分離定律。如果體內(nèi)能檢測到鐵結(jié)合蛋白基因，而表現(xiàn)為對潮霉素敏感，最有可能的就是潮霉素抗性基因沒有表達或者潮霉素抗性基因丟失。

考點：基因工程

點評：本題重在考查了基因工程中的操作步驟等方面的知識，屬于對識記、理解層次的考查。