Question

【題目】利用單克隆抗體特異的作用于埃博拉病毒侵染蛋白（VP40蛋白）是一種戰(zhàn)勝埃博拉病毒的有效途徑。請據(jù)圖回答：

（1）過程①中選用兩種限制酶切割，使目的基因的兩端產(chǎn)生不同的黏性末端，這樣處理的目的是___________。

（2）圖中過程②需要用___________處理大腸桿菌，原因是_____________________。

（3）在基因表達(dá)載體中，VP40蛋白基因的首端必須含有___________，其作用是能夠被___________識別和結(jié)合，從而保證③順利完成。

（4）為檢測VP40基因是否成功表達(dá)，可以采用___________技術(shù)。VP40蛋白抗體能夠戰(zhàn)勝埃博拉病毒的原因是______________________。

Answer 1

【答案】 防止目的基因與質(zhì)粒錯(cuò)誤連接（或防止目的基因環(huán)化） Ca2+ （CaCl2）處理過的大腸桿菌易于吸收質(zhì)粒（外源DNA）（或處于感受態(tài)） 啟動(dòng)子 RNA聚合酶 抗原-抗體雜交 VP40蛋白抗體與VP40蛋白結(jié)合，阻止了埃博拉病侵染細(xì)胞

【解析】試題分析：本題考查基因工程、細(xì)胞工程，考查對基因工程操作程序、單克隆抗體特點(diǎn)的理解。解答此題，可根據(jù)同種限制酶產(chǎn)生的黏性末端可以連接分析用兩種限制酶切割目的基因的原因，根據(jù)“基因成功表達(dá)”的含義判斷檢測VP40基因是否成功表達(dá)的方法。

（1）過程①中選用兩種限制酶切割，可以使目的基因的兩端產(chǎn)生不同的黏性末端，避免目的基因環(huán)化，保證目的基因按一定方向插入到質(zhì)粒中。

（2）圖中過程②用Ca2+處理大腸桿菌，可以增大細(xì)胞壁的通透性，使大腸桿菌易于吸收質(zhì)粒（外源DNA）（或處于感受態(tài)），提高轉(zhuǎn)化效率。

（3）基因表達(dá)載體中，VP40蛋白基因的首端必須含有啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)，可以啟動(dòng)VP40蛋白基因的轉(zhuǎn)錄。

（4）檢測VP40基因是否成功表達(dá)，即檢測VP40基因是否控制合成VP40蛋白，可以用VP40蛋白抗體進(jìn)行抗原—抗體檢測。VP40蛋白抗體可以特異性的和埃博拉病毒的VP40蛋白結(jié)合，使之凝集成團(tuán)，失去侵染細(xì)胞的能力。