Question

【題目】某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X、Y和Z），毎只小鼠免疫5次，毎次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)（能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如下圖所示。

若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目40條），并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。然后經(jīng)過小鼠腹腔內(nèi)增殖或體外培養(yǎng)，就可以獲取大的單克隆抗體A。

回答下列問題：

（1）制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上，則最少需要經(jīng)過__________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是__________小鼠，理由是__________。

（2）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交廇細(xì)胞外，可能還有__________。

（3）雜交瘤細(xì)胞中有__________個(gè)細(xì)胞核，染色休數(shù)目最多有__________條。

（4）在制備單克隆抗體的過程中，主要經(jīng)過兩次篩選，第一次是誘導(dǎo)融合之后篩選出_________細(xì)胞，第二次是篩選出__________細(xì)胞。

（5）獲取特異性抗體可以向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動(dòng)物產(chǎn)生抗體，然后從動(dòng)物血清中分離所需抗體。與這種方法制備的抗體相比，單克隆抗體具有__________、__________，并可以大量制備等優(yōu)點(diǎn)。

Answer 1

【答案】四YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞1200雜交瘤能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤特異性強(qiáng)靈敏度高

【解析】

根據(jù)題意分析，用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)；據(jù)圖分析可知，隨著免疫次數(shù)的增加，血清抗體效價(jià)逐漸升高；在第四次注射后，X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上；在第五次中，Y的效價(jià)最大，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞；B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞形成的雜交細(xì)胞有三種：B淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞；融合形成的雜交瘤細(xì)胞，具有2個(gè)親本的染色體，故染色體為100條。

（1）根據(jù)以上分析已知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上，小鼠Y的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價(jià)最高，最適用于制備單克隆抗體。

（2）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞。

（3）雜交瘤細(xì)胞中有1個(gè)細(xì)胞核，小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目40條）和骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目60條）融合后，染色體可達(dá)100條，在有絲分裂后期染色體數(shù)目臨時(shí)加倍為200條。

（4）在制備單克隆抗體的過程中，第一次篩選的目的是從融合細(xì)胞獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選的目的是獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（5）單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可以大量制備等優(yōu)點(diǎn)。