Question

根據(jù)基因工程的有關(guān)知識，回答下列問題： 
（1）質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoRI切割后產(chǎn)生的片段如下：

為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRI切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點是                                                 。 
（2）按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即       DNA連接酶和T₄DNA連接酶。 
（3）反轉(zhuǎn)錄作用的模板是                ，產(chǎn)物是                   。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，常采用               技術(shù)。 
（4）基因工程中除質(zhì)粒外，                    和                  也可作為運(yùn)載體。 
（5）若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是                                                                       。 

Answer 1

（1）切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRI切割產(chǎn)生的相同
（2）E·coli   （3）mRNA 單鏈DNA    PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）  
（4）動植物病毒    λ噬菌體的衍生物
（5）未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱

解析試題分析：（1）為使運(yùn)載體與目的基因相連，不同的限制酶應(yīng)切割出相同的黏性末端，它們必須要能識別相同的核苷酸序列，并且使每條鏈中相同的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。
（2）DNA連接酶，根據(jù)酶的來源不同，可以將這些酶分為兩類：一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為E·coli DNA連接酶；另一類是從T₄噬菌體中分離出來的，稱為T₄DNA連接酶。
（3）反轉(zhuǎn)錄是以RNA為模版來合成DNA的過程�？梢栽隗w外短時間內(nèi)大量擴(kuò)增DNA的技術(shù)叫PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）
（4）基因工程中運(yùn)載體除質(zhì)粒外，還有λ噬菌體的衍生物、動植物病毒等。
（5）大腸桿菌細(xì)胞外有細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，能阻止其他物質(zhì)的進(jìn)入，只能通過Ca²⁺處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞。
考點：基因工程
點評：本題考查了學(xué)生的識記能力和理解能力，屬于中檔題。