Question

【題目】物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，會(huì)污染土壤。 W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌（目標(biāo)菌）�；卮鹣铝袉栴}。

（1）在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是______________（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。要從土壤中分離目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是_________。

（2）在從土壤中分離目標(biāo)菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長(zhǎng)并形成菌落（如下圖所示）。如果要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇________菌落進(jìn)一步純化，選擇的依據(jù)是_________________________。

（3）對(duì)得到的目標(biāo)菌純化培養(yǎng)過程中，用稀釋涂布平板法進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，其計(jì)數(shù)結(jié)果比起真實(shí)值偏_____（填“高”，“低”），原因是____________________。

（4）實(shí)驗(yàn)過程中用到的各種器具，材料等都需要消毒或滅菌，其中培養(yǎng)基需要用____________方法滅菌，接種環(huán)的滅菌方法是 ____________。

（5）篩選得到的菌種進(jìn)行保藏，頻繁使用可用___________培養(yǎng)基4℃保藏，若長(zhǎng)期保存，可以采用與甘油混勻，-20℃冰箱保藏的方法。

Answer 1

【答案】蛋白胨 W 乙 乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W 低 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 高壓蒸汽滅菌 灼燒滅菌 固體斜面（培養(yǎng)基）

【解析】

常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

對(duì)于頻繁使用的菌種，常用臨時(shí)保藏法；對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，常用甘油管藏法。

（1）在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為其同時(shí)提供碳源、氮源。目標(biāo)菌是能降解W的細(xì)菌，故應(yīng)該選擇以W為唯一氮源的培養(yǎng)基分離目標(biāo)菌。

（2）乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W，故要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇W菌落進(jìn)一步純化。

（3）當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，故用稀釋涂布平板法進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，其計(jì)數(shù)結(jié)果比起真實(shí)值偏低。

（4）培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，接種環(huán)常用灼燒滅菌。

（5）對(duì)頻繁使用的菌種，常用固體斜面培養(yǎng)基4℃保藏，若長(zhǎng)期保存，可以采用與甘油混勻，-20℃冰箱保藏的方法。