Question

19．一對表現(xiàn)型正常的夫婦，生了一個β地中海貧血癥患兒．在他們欲生育第二胎時，發(fā)現(xiàn)妻子的雙側(cè)輸卵管完全堵塞，不能完成體內(nèi)受精．醫(yī)生為該夫婦實施了體外受精和產(chǎn)前基因診斷，最終喜獲一健康女嬰．請回答：
（1）哺乳動物的體外受精主要包括卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精 等主要步驟．
（2）在對胎兒進行β地中海貧血癥的產(chǎn)前基因診斷時，要先從羊水中的胎兒細胞提取DNA進行PCR擴增，然后用限制酶對擴增產(chǎn)物進行切割，產(chǎn)生多個片段的酶切產(chǎn)物，再根據(jù)不同長度的酶切產(chǎn)物在電泳時移動的速率不同，形成不同的電泳條帶進行判斷．
①PCR擴增與體內(nèi)DNA復(fù)制過程中，解旋的方法不同，前者通過高溫解開雙鏈，后者通過解旋酶解開雙鏈．
②一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，大多數(shù)限制酶的識別序列由6個核苷酸組成．DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式，即黏性末端和平末端．當限制酶在它識別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時，產(chǎn)生的是黏性末端．
③利用PCR擴增目的基因也是目的基因獲取的方法之一，除此以外，目的基因還可以從基因文庫中獲取，基因文庫包含部分基因文庫 和基因組文庫 等類型，后者的基因中含有啟動子．
④基因診斷的主要原理是DNA分子雜交（不可答“堿基互補配對”）．

Answer 1

分析 1、PCR的過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開．
2、限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．形成黏性末端和平末端兩種．
3、基因診斷技術(shù)它的基本原理是：互補的DNA單鏈能夠在一定條件下結(jié)合成雙鏈，即能夠進行雜交．這種結(jié)合是特異的，即嚴格按照堿基互補的原則進行，它不僅能在DNA和DNA之間進行，也能在DNA和RNA之間進行．因此，當用一段已知基因的核酸序列作出探針，與變性后的單鏈基因組DNA接觸時，如果兩者的堿基完全配對，它們即互補地結(jié)合成雙鏈，從而表明被測基因組DNA中含有已知的基因序列．

解答 解：（1）哺乳動物的體外受精主要包括卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精等主要步驟．
（2）①PCR擴增與體內(nèi)DNA復(fù)制過程中，解旋的方法不同，前者通過高溫解開雙鏈，后者通過解旋酶解開雙鏈．
②大多數(shù)限制酶的識別序列由6個核苷酸組成．DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式，即黏性末端和平末端．當限制酶在它識別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時，產(chǎn)生的是黏性末端．
③基因文庫包含部分基因文庫和基因組文庫

文庫類型	cDNA	基因組文庫
文庫大小	小	大
基因中啟動子	無	有
基因中內(nèi)含子	無	有
基因多少	某種生物的部分基因	某種生物的全部基因
物種間的基因交流	可以	部分基因可以

④基因診斷的主要原理是DNA分子雜交．
故答案為：
（1）卵母細胞的采集和培養(yǎng)      精子的采集和獲能     受精
（2）①高溫    解旋酶      
②6    黏性末端
③部分基因文庫    基因組文庫       
④DNA分子雜交（不可答“堿基互補配對”）

點評 本題考查體外受精技術(shù)、基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識記體外受精技術(shù)具體步驟；識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合所學的知識準確答題，屬于考綱識記層次的考查．