Question

【題目】有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受油污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株。回答問題：

（1）在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基土，目的是____________________________，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。

（2）純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，可以計(jì)數(shù)的是 ____________

（3）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力__________。

（4）菌種長期保存方法為__________。

（5）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_______和________。無菌技術(shù)要求試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈________________附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。

Answer 1

【答案】原油 篩選出能降解原油的菌株 選擇 稀釋涂布平板法 大 甘油管藏法 干熱 高壓蒸汽 火焰

【解析】

（1）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。培養(yǎng)基的分類：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂。②按化學(xué)成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)。兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的。

③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌。

（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。

培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法。

（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體——菌落。

（1）欲篩選出能降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無其它碳源，不能降解原油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存，這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）分離純化菌種時(shí)，需采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可以用來計(jì)數(shù)。

（3）降解原油能力越強(qiáng)的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大。

（4）菌種可以通過甘油管藏法長期保存。

（5）實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環(huán)）、干熱滅菌（如培養(yǎng)皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養(yǎng)基）等．無菌操作要求在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中操作都在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免周圍微生物的污染。