Question

近十年來，PCR技術(shù)（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室里的一種常規(guī)手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制（如圖），在很短的時(shí)間內(nèi)，將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍，使實(shí)驗(yàn)所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體．


（1）加熱使DNA雙鏈打開，這一步是打開

 

鍵，在細(xì)胞中是在

 

的作用下使此鍵斷裂．
（2）當(dāng)溫度降低時(shí)，引物與模板 3’端結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最終合成2個(gè)DNA分子，此過程中遵循的原則是

 

．
（4）PCR技術(shù)的必要條件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少還需要三個(gè)條件．即：液體環(huán)境、適宜的溫度和

 

．
（5）PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為

 

、

 

、

 

三個(gè)步驟．

Answer 1

考點(diǎn)：PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用

專題：

分析：PCR技術(shù)：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
2、原理：DNA復(fù)制．
3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物．
4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開．

解答： 解：（1）PCR擴(kuò)增中，雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開，而在細(xì)胞中，氫鍵是在解旋酶的作用下斷裂的．
（2）中溫延伸過程中遵循堿基互補(bǔ)配對原則．
（4）PCR技術(shù)的必要條件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少還需要三個(gè)條件．即：液體環(huán)境、適宜的溫度和引物．
（5）PCR技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)過程分為高溫變性、低溫復(fù)性和中溫延伸三個(gè)步驟．
故答案為：
（1）氫     解旋酶
（2）堿基互補(bǔ)配對原則
（3）引物
（4）變性、復(fù)性、延伸

點(diǎn)評：本題結(jié)合圖解，考查PCR技術(shù)的相關(guān)知識，要求考生識記PCR技術(shù)的概念、原理、條件及過程，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記層次的考查．