Question

青枯病是馬鈴薯生產(chǎn)中一種危害嚴重的細菌性病害。1996年，我國科學家首次在世界上獲得抗青枯病轉(zhuǎn)基因馬鈴薯株系，為防治這種毀滅性病害開辟了道路。他們根據(jù)存在于昆蟲體內(nèi)的抗菌肽的氨基酸序列，人工設計并合成了幾個抗菌肽基因，例如ShivaA,CecropinB等基因，并將其導入馬鈴薯中，轉(zhuǎn)基因馬鈴薯獲得了青枯病抗性的表型。

（1）在克隆基因過程中，通常采用____技術對目的基因進行擴增，下列由一個DNA分子擴增為兩個DNA分子過程的敘述中，正確的序號順序是____。
①引物與單鏈相應互補序列結合②目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈 ③DNA聚合酶作用下復制

（2）基因工程的第二步是____。一個完整的重組DNA分子的組成除了目的基因外還必須有____、____以及____等。

（3）通常用____方法檢測新育出的植株染色體DNA上是否插入了抗菌肽基因。

Answer 1

（1）PCR ②①③

（2）制備重組DNA分子（基因表達載體的構建）啟動子 終止子標記基因

（3）（DNA）雜交法

對目的基因擴增通過采用PCR技術，DNA擴增先變性解鏈，再復性連接上引物，最后在DNA聚合酶作用延伸擴增。基因工程操作步驟為提取目的基因，基因表達載體的構建，完整的基因表達載體由啟動子、目的基因、終止子、標記基因構成，通常還應有復制原點，目的基因?qū)�入受體細胞，目的基因檢測與表達，通常采用DNA雜交技術進行檢測。利用抗原—抗體反應或個體水平檢測是否表達。