Question

【題目】為獲得高效降低膽固醇的乳酸菌，科研人員做了如下實驗。

(1)取適量發(fā)酵酸肉，剪碎并研磨，磨碎后加入______制成1:10稀釋液，再梯度稀釋為10-6倍稀釋液，涂布于因添加了CaCO3而不透明的乳酸菌培養(yǎng)基(MRS培養(yǎng)基)平板上，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解CaCO3，在_______(填“有氧”或“無氧”)條件下恒溫靜置培養(yǎng)48小時。挑取具有______的菌落，用_______法接種在MRS培養(yǎng)基上純化�？赏ㄟ^觀察菌落的_____判斷是否達到了純化。

(2)純化后的乳酸菌菌株接種到高膽固醇培養(yǎng)液中培養(yǎng)，一段時間后離心測定______中膽固醇的含量，以______作為對照，測定菌株降膽固醇的能力，篩選出目的菌株。

Answer 1

【答案】無菌水 無氧 溶鈣圈(或“透明圈”) 劃線 形態(tài)、大小等特征 上清液 未接種的高膽固醇培養(yǎng)液

【解析】

1、篩選與分離微生物常用的接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法。觀察菌落特征可以區(qū)分不同的微生物。

2、微生物常見的接種方法

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板、接種、劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（1）根據(jù)題意可知，需要將取出的含有乳酸菌的菌株剪碎并研磨，磨碎后加入無菌水制成1：10稀釋液，再梯度稀釋到10-6的稀釋液，涂布于添加了CaCO3的乳酸細菌培養(yǎng)基（MRS培養(yǎng)基）平板上，由于乳酸菌是厭氧微生物，所以需要在無氧條件下恒溫靜置培養(yǎng)48小時。挑取具有溶鈣圈（或“透明圈）的菌落，用平板劃線法接種在MRS培養(yǎng)基上純化。可通過觀察菌落的形態(tài)、大小來判斷是否達到了純化。
（2）膽固醇屬于脂質，密度較小，存在于上清液中，所以純化后的乳酸菌菌株接種到高膽固醇培養(yǎng)液中培養(yǎng)，一段時間后離心測定上清液中膽固醇的含量，以未接種的高膽固醇培養(yǎng)液作為對照，測定菌株降膽固醇的能力，篩選出目的菌株。