Question

如圖表示運用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的三種途徑，據(jù)圖請回答：

（1）為了便于將含目的基因的細胞篩選出來，所選擇的重組質(zhì)粒上應該具有

 

．構(gòu)成重組質(zhì)粒M時，通常要用

 

分別切割

 

和

 

．
（2）培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因羊的過程整，科研人員通過

 

技術(shù)將重組質(zhì)粒M轉(zhuǎn)移到受體A中，受體A應該是

 

．
（3）蝸居為雙子葉植物，過程②常用的方法是

 

，④過程常采用的技術(shù)室

 

．
（4）過程⑤常采用

 

處理大腸桿菌，使之成為

 

細胞，利于完成轉(zhuǎn)化過程．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答： 解：（1）為了便于將含目的基因的細胞篩選出來，所選擇的重組質(zhì)粒上應該具有標記基因．構(gòu)成重組質(zhì)粒M時，通常要用（同種）限制性核酸內(nèi)切酶分別切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒，再用DNA連接酶將目的基因和質(zhì)粒連接形成重組質(zhì)粒．
（2）將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；由于受精卵的全能性最高，因此培育轉(zhuǎn)基因動物時，應以受精卵作為受體細胞．
（3）將目的基因?qū)�入植物細胞最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；將轉(zhuǎn)基因植物細胞培育成轉(zhuǎn)基因植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
（4）將目的基因?qū)�入微生物細胞常用感受態(tài)細胞法，即用Ca²⁺（或CaCl₂）處理大腸桿菌，使之成為感受態(tài)細胞，利于完成轉(zhuǎn)化過程．
故答案為：
（1）標記基因    （同種）限制性核酸內(nèi)切酶   含目的基因的DNA片段    質(zhì)粒
（2）顯微注射   受精卵
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法    植物組織培養(yǎng)
（4）Ca²⁺（或CaCl₂）     感受態(tài)

點評：本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作工具及具體的操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細節(jié)，能結(jié)合圖中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．