Question

人乳頭狀瘤病毒(HPV)與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，抗HPV的單克隆抗體可以準確檢測出HPV，從而及時監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生，以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過程，請據(jù)圖回答：

(1)單克隆抗體制備過程中涉及的細胞工程技術(shù)有 ??????????? 。

(2)若要分析雜交瘤細胞中染色體，可通過???????? 等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察。雜交瘤細胞中染色體數(shù)目與普通淋巴細胞相比具有的特點是????? ，在HAT培養(yǎng)基上存活的細胞可能包括??? (填下列序號)。①無抗體分泌的細胞? ②抗HPV抗體的分泌細胞③其它無關(guān)抗體的分泌細胞

(3)對于抗體檢測呈??????????? 性的雜交克隆應盡早進行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細胞到3～l0個細胞/mL，每孔加入細胞稀釋液?????? mL(0.1／1／10)，使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的。

(4)由上述過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體，理由是???????? 。

(5)科學家從某些無限增殖細胞的細胞質(zhì)中分離出了無限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)動物細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。除本題描述的一種制備單克隆抗體技術(shù)外，請再簡要寫出一種制備單克隆抗體的思路 ????????????????????????????????? 。

 

Answer 1

【答案】

（1）動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合（2分）? （2）解離、漂洗、染色和制片? 染色體數(shù)目加倍? ①②③ （2分）（3）陽? 0.1 （4）因為小鼠形成的抗體對人體來說是抗原，存在著排異反應（2分）

（5）通過基因工程向漿細胞中導入prG、利用核移植技術(shù)將漿細胞的細胞核移植到去核的無限增殖細胞中

【解析】

試題分析：（1）單克隆抗體制備過程中要將淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞，為動物細胞融合技術(shù)，要培養(yǎng)雜交瘤細胞，為動物細胞培養(yǎng)技術(shù)。

（2）觀察細胞染色體制片流程：解離、漂洗、染色和制片。雜交瘤細胞具有無限增殖能力，觀察到的染色體數(shù)目往往增倍，而普通淋巴細胞高度分化，能夠產(chǎn)生抗體，不再分裂，染色體數(shù)目不增倍。雜交瘤細胞不能在HAT培養(yǎng)基上存活，故其他類型融合細胞可以生存，即骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞的融合細胞，能夠產(chǎn)生抗HPV抗體淋巴細胞與能夠產(chǎn)生抗HPV抗體淋巴細胞融合細胞，不能夠產(chǎn)生抗HPV抗體淋巴細胞與不能夠產(chǎn)生抗HPV抗體淋巴細胞的融合細胞，故①②③都能生存。

(3)檢測后能夠產(chǎn)生抗HPV抗體即抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞要行克隆化，以便產(chǎn)生單克隆抗體。有限稀釋法因為稀釋細胞到3～l0個細胞/mL，故每孔加入細胞稀釋液0.1 mL，，使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的。

（4）因為小鼠形成的抗體對人體來說是抗原，存在著排異反應，故由上述過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體。

（5）據(jù)題意，可以通過基因工程向漿細胞細胞核染色體DNA中導入prG，提取該漿細胞細胞核，和去核的無限增殖細胞融合為重組細胞，進行細胞培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體。

考點：本題考查單克隆抗體激素相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)能力；能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論能力。