基因工程中，外源DNA片段常用PCR方法擴(kuò)增，擴(kuò)增后需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。下表列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）含目的基因的外源DNA片段用PCR方法擴(kuò)增時(shí)使用DNA聚合酶，其不同于一般生

物體內(nèi)DNA聚合酶的最主要特點(diǎn)是　 ▲　 。PCR過(guò)程中退火（復(fù)性）溫度必須根據(jù)引物的堿基數(shù)量和種類來(lái)設(shè)定。表1為根據(jù)模板設(shè)計(jì)的兩對(duì)引物序列，圖1為引物對(duì)與模板結(jié)合示意圖。請(qǐng)判斷哪一對(duì)引物可采用較高的退火溫度？　 ▲　 。

（2）圖2中的質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，一般不只用AluⅠ一種酶切割，原因是　 ▲　 。

（3）圖2中獲取的重組質(zhì)粒時(shí)運(yùn)用了　 ▲　 限制酶切割，切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，加入了　 ▲　 酶，該酶是對(duì)所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求？　 ▲　 。

（4）重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞后，通常要進(jìn)行檢測(cè)。若要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，可用　 ▲　 技術(shù)；若要檢測(cè)目的基因是否表達(dá)出蛋白質(zhì)，可用　 ▲　 技術(shù)。

 

（1）耐高溫 引物對(duì)B

（2）質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身會(huì)連接環(huán)化

（3）AluⅠ和BamHⅠ DNA連接酶　 否

（4）分子雜交（DNA-RNA分子雜交） 　抗原—抗體雜交

 

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

下列關(guān)于基因工程說(shuō)法正確的有幾項(xiàng)                   （    ）

       ①一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸。

       ②若要生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因抗病水稻，可將目的基因先導(dǎo)入到大腸桿菌中，再轉(zhuǎn)入水稻細(xì)胞中。

       ③載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞。

       ④基因工程中，外源基因可以從基因庫(kù)中直接獲取。

       ⑤轉(zhuǎn)基因植物的培育利用了細(xì)胞的全能性。

       ⑥可以利用基因工程培育生物的新物種。

       A．一項(xiàng)               B．二項(xiàng)               C．三項(xiàng)          D．四項(xiàng)

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科目：高中生物 來(lái)源：浙江省寧波市2010年高三年級(jí)“十�！甭�(lián)考（理綜生物）試題 題型：選擇題

下列關(guān)于基因工程說(shuō)法正確的有幾項(xiàng)                                                                      （    ）

       ①一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸。

       ②若要生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因抗病水稻，可將目的基因先導(dǎo)入到大腸桿菌中，再轉(zhuǎn)入水稻細(xì)胞中。

       ③載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞。

       ④基因工程中，外源基因可以從基因庫(kù)中直接獲取。

       ⑤轉(zhuǎn)基因植物的培育利用了細(xì)胞的全能性。

       ⑥可以利用基因工程培育生物的新物種。

       A．一項(xiàng)          B．二項(xiàng)           C．三項(xiàng)              D．四項(xiàng)

 

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科目：高中生物 來(lái)源：2010年湖北省武漢市武昌區(qū)高三五月調(diào)研測(cè)試?yán)砭C生物試題 題型：選擇題

PCR技術(shù)是基因工程中獲得外源基因的一個(gè)有效手段，該項(xiàng)技術(shù)就是在體外通過(guò)酶促反應(yīng)成百萬(wàn)倍地?cái)U(kuò)增一段目的基因。用PCR儀擴(kuò)增抗棉鈴蟲(chóng)基因時(shí)，PCR反應(yīng)體系中必須加入的酶是    （    ）

 A．限制性內(nèi)切酶 B．DNA連接酶 C．解旋酶 D．DNA聚合酶

 

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科目：高中生物 來(lái)源：2010年湖北省武漢市武昌區(qū)高三五月調(diào)研測(cè)試?yán)砭C生物試題 題型：單選題

PCR技術(shù)是基因工程中獲得外源基因的一個(gè)有效手段，該項(xiàng)技術(shù)就是在體外通過(guò)酶促反應(yīng)成百萬(wàn)倍地?cái)U(kuò)增一段目的基因。用PCR儀擴(kuò)增抗棉鈴蟲(chóng)基因時(shí)，PCR反應(yīng)體系中必須加入的酶是   （   ）

A．限制性內(nèi)切酶B．DNA連接酶C．解旋酶D．DNA聚合酶

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