Question

10．凝乳酶是奶酪生產(chǎn)中的關(guān)鍵性酶．目前，利用微生物生產(chǎn)高活力的凝乳酶是主要發(fā)展方向．如圖1，用紫外線照射芽孢桿菌，分離、培養(yǎng)，再檢測(cè)各菌株所產(chǎn)生的凝乳酶活力．請(qǐng)回答下列問題：

（1）為達(dá)到分離的目的，需要配制培養(yǎng)基，主要步驟是計(jì)算→稱量→溶化→調(diào)pH→分裝→倒平板．在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．
（2）圖中過程b的目的是通過平板劃線法獲得單個(gè)菌落；通常使用的劃線工具是接種環(huán)．
（3）上述平板培養(yǎng)基中應(yīng)含有碳源、氮源（缺一不可）、水和無機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)成分．固體培養(yǎng)基中常用瓊脂作凝固劑，理想的凝固劑應(yīng)具有的特點(diǎn)是B、D、E（多選）．
A．含有某些特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)    B．消毒滅菌不會(huì)改變其特性
C．能被微生物分解和利用      D．微生物生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)
E．配制方便且有良好的透明性
（4）在一定溫度下（35℃），一定時(shí)間內(nèi)（通常為40分鐘），凝固1mL10%脫脂奶粉的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）凝乳酶活力檢測(cè)結(jié)果如圖2所示，圖示說明基因突變是不定向的．
（5）同樣是桿菌，但作用大相徑庭．綠膿桿菌常引發(fā)燒傷病人化膿性感染，臨床上常用阿洛西林、比阿培南、美羅培南、頭孢菌素等抗生素進(jìn)行治療．為確定患者體內(nèi)的綠膿桿菌對(duì)上述不同抗生素的敏感性，做了相關(guān)的實(shí)驗(yàn)．將含等劑量的阿洛西林、比阿培南、美羅培南、頭孢菌素的相同大小的濾紙片分別均勻置于平板培養(yǎng)基上的不同位置，適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察結(jié)果如圖3．根據(jù)結(jié)果判斷，患者最適宜選用的抗生素是美羅培南．

Answer 1

分析 微生物的培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分主要有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等．微生物培養(yǎng)基的制作過程為計(jì)算→稱量→溶化→調(diào)節(jié)pH→分裝→倒平板．微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作．基因突變是不定向的．

解答 解：（1）配制培養(yǎng)基，主要步驟是計(jì)算→稱量→溶化→調(diào)節(jié)pH→分裝→倒平板．在接種前，需要檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可以隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間．
（2）平板劃線法是純化微生物的常用方法，可以獲得單個(gè)菌落；通常使用的劃線工具是接種環(huán)．
（3）平板培養(yǎng)基中應(yīng)含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)成分．固體培養(yǎng)基中理想的凝固劑應(yīng)具有的特點(diǎn)有：消毒滅菌不會(huì)改變其特性、微生物生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi)保持固體狀、配制方便且有良好的透明性等，而凝固劑本身不能含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)且不能被微生物分解和利用．
（4）芽孢桿菌經(jīng)紫外線照射后，凝乳酶活力發(fā)生了多種方向的變化，說明基因突變是不定向的．
（5）臨床上常用抗生素進(jìn)行治療細(xì)菌感染．根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果判斷，美羅培南周圍空白區(qū)域（沒有菌落）最大，說明美羅培南殺滅綠膿桿菌的效果最好．
故答案為：
（1）調(diào)pH   檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格  
（2）單個(gè)菌落     接種環(huán) 
（3）碳源、氮源（缺一不可）        B、D、E  
（4）不定向的    
（5）美羅培南

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查微生物的培養(yǎng)基酶活力的測(cè)定，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)的操作機(jī)無菌技術(shù)的理解與掌握．