【題目】相關研究表明,蜂毒素可引起細胞凋亡?蒲腥藛T為進一步研究蜂毒素對人胃癌細胞的影響及作用機制,進行了以下實驗。請完善相關實驗并回答問題。

(1)方法步驟:

a.取4只相同的培養(yǎng)瓶,編號,分別加入等量的完全培養(yǎng)液和__________。

b.1號培養(yǎng)瓶為空白對照,向2-4號培養(yǎng)瓶中分別加入____________

c.培養(yǎng)48h后,檢測并統(tǒng)計____________,結果如下圖所示:

(2)分析與討論:

a.圖-1表明:_______________。增強

b.圖-1、圖-2表明:促進胃癌細胞凋亡的是__________,抑制胃癌細胞凋亡的是____________ 。因此,從基因水平上看,蜂毒素誘導胃癌細胞凋亡的原理是____________

【答案】等量的(離體)胃癌細胞 2、4、6μg/mL蜂毒素溶液 胃癌細胞凋亡率及Bax蛋白、Bel-2蛋白的含量 蜂毒素能誘導胃癌細胞凋亡,一定范圍內隨蜂毒素濃度增大誘導效應增強 Bax蛋白 Bel-2蛋白 能夠促進Bax基因的表達、抑制Bel-2基因的表達

【解析】

本實驗的目的是“進一步研究蜂毒素對人胃癌細胞的影響及作用機制”,自變量為蜂毒素的濃度,因變量為胃癌細胞凋亡率以及Bax蛋白、Bel-2蛋白的含量,各組中培養(yǎng)的胃癌細胞的數(shù)量、蜂毒素的量等均為無關變量,各組中的無關變量應相同且適宜。

(1)a.本實驗是研究蜂毒素對人胃癌細胞的影響及作用機制,故應在各組中培養(yǎng)相同數(shù)量的癌細胞,具體操作為:取4只相同的培養(yǎng)瓶,編號,分別加入等量的完全培養(yǎng)液并接種等量離體胃癌細胞。

b.圖-1所示自變量為蜂毒素濃度,由圖中曲線描述數(shù)值可知,四組濃度分別為:0、2、4、6(單位:μg/ mL),1號培養(yǎng)瓶為空白對照,故應向2~4號培養(yǎng)瓶中分別加入等量的2ug/ml、4ug/ml、6ug/ml蜂毒素溶液。

c.根據(jù)圖1、圖2的縱坐標可知培養(yǎng)48小時之后,檢測并統(tǒng)計胃癌細胞的凋亡率及Bax蛋白、Bel-2蛋白的含量。

(2)a.根據(jù)圖1的橫坐標與縱坐標的含義可知,一定濃度的蜂毒素能誘導胃癌細胞凋亡,并隨著濃度增大誘導效應增強。

b.由圖1、圖2表明:蜂毒素能誘導胃癌細胞凋亡,從分子水平看,細胞凋亡過程中Bax蛋白增多,Bel-2蛋白減少,故推測促進胃癌細胞凋亡的是Bax蛋白,抑制胃癌細胞凋亡的是Bel-2蛋白。從基因水平上看,蜂毒素誘導胃癌細胞凋亡與Bax基因表達增強和Bel—2基因表達減弱有關,即通過促進Bax基因的表達、抑制Bel-2基因的表達來促進細胞凋亡,當Bel—2蛋白/Bax蛋白的比值出現(xiàn)降低趨勢時,將會誘導胃癌細胞凋亡。

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