Question

7．有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株．回答問題：

（1）在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上．
（2）如果要測定②中活細菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法法，在⑥上獲得單菌落的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，若圖中④為對照實驗，則應(yīng)以除原油外的其他碳源作為碳源．
（3）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌滅菌和干熱滅菌．無菌技術(shù)要求實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染．

Answer 1

分析 （1）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．培養(yǎng)基的分類：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學(xué)成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)．兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌．
（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．

解答 解：（1）欲篩選出能降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無其它碳源，不能降解原油的細菌在此培養(yǎng)基上不能生存．
（2）常采用稀釋涂布平板法法可以測定②中活細菌數(shù)量，純化菌種獲得單一菌種常采用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．該實驗的對照實驗應(yīng)該以除原油外的其他碳源．
接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．
（3）實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環(huán)）、干熱滅菌（如培養(yǎng)皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養(yǎng)基）等．無菌操作要求在整個實驗過程中操作都在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍微生物的污染．
故答案為：
（1）原油
（2）稀釋涂布平板法   平板劃線法和稀釋涂布平板法  除原油外的其他碳源
（3）高壓蒸汽滅菌    火焰

點評 本題的知識點是微生物培養(yǎng)過程中的無菌技術(shù)，分離微生物的常用的接種方法和接種工具，主要考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．