Question

17．如圖表示構(gòu)建轉(zhuǎn)人抗體基因小鼠生產(chǎn)人源性單克隆抗體的流程．請據(jù)圖回答問題：

（1）圖示過程涉及的生物技術(shù)有轉(zhuǎn)基因技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合．
（2）要在分子水平上檢測成功導(dǎo)入的人抗體基因在大鼠中是否成功表達(dá)，可采用抗原-抗體雜交方法，在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中，人抗體基因的首端必須有啟動子，它是RNA聚合酶的識別和結(jié)合部位．
（3）向轉(zhuǎn)基因小鼠注射特定的抗原后，從小鼠的脾臟中提取B淋巴細(xì)胞；②過程通常用聚乙二醇或滅活的病毒誘導(dǎo)．
（4）細(xì)胞X的特點(diǎn)是既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體．經(jīng)選擇性培養(yǎng)的細(xì)胞X，還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞，進(jìn)行體內(nèi)或體外培養(yǎng)．培養(yǎng)過程中會產(chǎn)生接觸抑制現(xiàn)象嗎？否．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示構(gòu)建轉(zhuǎn)人抗體基因小鼠生產(chǎn)人源性單克隆抗體的流程，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；②表示動物細(xì)胞融合過程（骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合）．

解答 解：（1）圖示過程涉及的生物技術(shù)有轉(zhuǎn)基因技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、動物細(xì)胞融合技術(shù)、體外受精技術(shù)等．
（2）檢測目的基因是否表達(dá)常用抗原-抗體雜交法；基因表達(dá)載體由啟動子、終止子、標(biāo)記基因和目的基因組成，因此在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中，人抗體基因的首端必須有啟動子，它是RNA聚合酶的識別和結(jié)合部位．
（3）向轉(zhuǎn)基因小鼠注射特定的抗原后，從小鼠的脾臟中提取B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法包括物理法（離心、振動和電刺激）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（如滅活的病毒）．
（4）細(xì)胞X是骨髓瘤細(xì)胞與已免疫的B淋巴細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞，其特點(diǎn)是既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體．經(jīng)選擇性培養(yǎng)的細(xì)胞X，還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞，進(jìn)行體內(nèi)或體外培養(yǎng)．雜交瘤細(xì)胞可以無限增殖，因此培養(yǎng)過程中不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象．
故答案為：
（1）轉(zhuǎn)基因技術(shù)  動物細(xì)胞培養(yǎng)  動物細(xì)胞融合
（2）抗原-抗體雜交  啟動子  RNA聚合酶的識別和結(jié)合  
（3）B淋巴細(xì)胞   聚乙二醇或滅活的病毒  
（4）既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體      克隆化培養(yǎng)     否

點(diǎn)評 本題結(jié)合構(gòu)建轉(zhuǎn)人抗體基因小鼠生產(chǎn)人源性單克隆抗體的流程圖，考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的基本操作步驟；識記動物細(xì)胞融合的方法及應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．