在適當(dāng)條件下,變性的DNA分開(kāi)的兩條鏈又重新結(jié)合而恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu)的過(guò)程被稱(chēng)為
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點(diǎn)撥:變性是指在高溫條件下, DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)被打開(kāi);在適當(dāng)?shù)臈l件下,打開(kāi)的兩條鏈恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu)的過(guò)程被稱(chēng)為DNA復(fù)性。 |
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:043
Taq DNA聚合酶是從一種耐高溫細(xì)菌中分離提取的。該菌是1966年從美國(guó)黃石國(guó)家公園的一個(gè)熱泉中發(fā)現(xiàn)的。實(shí)驗(yàn)表明,PCR反應(yīng)時(shí)變性溫度為80~100℃,50個(gè)循環(huán)后,Taq DNA聚合酶仍有65%的活性。Taq DNA聚合酶的熱穩(wěn)定性是該酶用于PCR反應(yīng)的前提條件,也是PCR反應(yīng)能迅速發(fā)展和廣泛應(yīng)用的原因。Taq DNA聚合酶還具有逆轉(zhuǎn)錄活性,其作用類(lèi)似逆轉(zhuǎn)錄酶。Taq DNA聚合酶表現(xiàn)為對(duì)依賴(lài),該酶的催化活性對(duì)濃度非常敏感。測(cè)定結(jié)果為濃度在2.0 m mol/L時(shí)該酶催化活性最高,此濃度能最大限度地激活Taq DNA聚合酶的活性,濃度過(guò)高就會(huì)抑制酶活性,因而的濃度在不同的反應(yīng)體系中應(yīng)適當(dāng)調(diào)整,優(yōu)化濃度。Taq DNA聚合酶具有5′→3′聚合酶活性和5′→3′外切酶活性,而無(wú)3′→5′外切酶活性,它不具有校正活性。因而在PCR反應(yīng)中如發(fā)生某些堿基的錯(cuò)配,該酶是沒(méi)有校正功能的。Taq DNA聚合酶的堿基錯(cuò)配概率為2.1×。
(1)Taq DNA聚合酶在高溫下仍能保持活性,因此PCR擴(kuò)增時(shí)可以________加入,________(填“需要”或“不需要”)再添加。
(2)影響PCR反應(yīng)的影響因素除引物、反應(yīng)溫度和時(shí)間、TaqDNA聚合酶濃度外,從材料中可知,還應(yīng)有________________。
(3)這種嗜熱細(xì)菌能夠在熱泉中生存,這是________________的結(jié)果。
(4)PCR反應(yīng)中由堿基錯(cuò)配引起的變異屬于________________,假設(shè)對(duì)一個(gè)DNA進(jìn)行擴(kuò)增,第一次循環(huán)時(shí)某一模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配,則擴(kuò)增若干次后檢測(cè)所有DNA的擴(kuò)增片段與原DNA相應(yīng)片段相同的占________________。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:單選題
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:閱讀理解
Taq DNA聚合酶是從一種嗜熱細(xì)菌中分離提取的,該菌是1966年從美國(guó)黃石國(guó)家森林公園的一個(gè)熱泉中發(fā)現(xiàn)的。實(shí)驗(yàn)表明,PCR反應(yīng)時(shí)變性溫度為95 ℃,50個(gè)循環(huán)后,Taq DNA聚合酶仍有65%的活性。Taq DNA聚合酶的熱穩(wěn)定性是該酶用于PCR的前提條件,也是PCR技術(shù)能迅速發(fā)展和廣泛應(yīng)用的原因。Taq DNA聚合酶還具有逆轉(zhuǎn)靈活性,其作用類(lèi)似于逆轉(zhuǎn)錄酶。Taq DNA聚合酶表現(xiàn)為Mg2+依賴(lài),該酶的催化活性對(duì)Mg 2+濃度非常敏感。測(cè)定結(jié)果為MgCl2濃度在2.0 mmol/L時(shí)該酶催化活性最高,此濃度能最大限度地激活Taq DNA聚合酶的活性,Mg2+過(guò)高就抑制酶活性,因而MgCl2的濃度在不同的反應(yīng)體系中應(yīng)適當(dāng)調(diào)整,優(yōu)化濃度。Taq DNA聚合酶具有5′→3′聚合酶活性和5′→3′外切酶活性,而無(wú)3′→5′外切酶活性,它不具有校對(duì)活性。因而在PCR中如發(fā)生某些堿基的錯(cuò)配,該酶是沒(méi)有校正功能的。Taq DNA聚合酶的堿基錯(cuò)配幾率為2.1×10-4。
(1)Taq DNA聚合酶在高溫下仍保持活性,因此在PCR擴(kuò)增時(shí)可以________加入,________(填“需要”或“不需要”)再添加。
(2)影響PCR反應(yīng)的影響因素除引物、反應(yīng)溫度、時(shí)間和TaqDNA聚合酶濃度外,從材料中可知,還應(yīng)有________。
(3)這種嗜熱細(xì)菌能夠在熱泉中生存,這是________的結(jié)果。
(4)PCR中由堿基錯(cuò)配引起的變異屬于________。假設(shè)對(duì)一個(gè)DNA進(jìn)行擴(kuò)增,第一次循環(huán)時(shí)某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配,則擴(kuò)增若干次后檢測(cè)所有DNA的擴(kuò)增片段,與原DNA相應(yīng)片段相同的占________。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
熱變性的DNA分子,在適當(dāng)條件下可以復(fù)性,條什之一是
A.濃縮 B.加入無(wú)機(jī)鹽 C.驟然冷卻 D.緩慢冷卻
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