Question

人的血清白蛋白（HSA）在臨床上需求量很大，通常從人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人類(lèi)感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對(duì)血液制品顧慮重重。如果應(yīng)用基因工程和克隆技術(shù)，將人的血清白蛋白基因轉(zhuǎn)入奶牛細(xì)胞中，那么利用牛的乳汁生產(chǎn)血清白蛋白就成為可能。其大致過(guò)程如下：

I．采集良種供體奶牛的卵母細(xì)胞和精液，通過(guò)體外受精，形成奶牛受精卵；

II．將人血清白蛋白基因?qū)�入奶牛受精卵，形成重組細(xì)胞；

III．電脈沖刺激重組細(xì)胞促使其形成早期胚胎；

IV．將胚胎移植到受體母牛的子宮中，最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛。

請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）一般情況下，良種奶牛所產(chǎn)生的能用于體外受精的卵母細(xì)胞往往數(shù)量不足，請(qǐng)舉出一種可以獲得更多卵母細(xì)胞的方法：  　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

（2）步驟I中，在體外受精前，需要對(duì)奶牛的精子進(jìn)行  　　  處理。受精時(shí)，往往一個(gè)卵母細(xì)胞只能和一個(gè)精子結(jié)合，受精過(guò)程中防止多精入卵的生理反應(yīng)包括  　　    反應(yīng)和卵黃膜封閉作用。

（3）步驟II中，將人的血清白蛋白基因?qū)�入奶牛受精卵最為有效的方法�?u>  　　     。導(dǎo)入基因前，需要將血清白蛋白基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，這一步驟屬于基因工程“四步曲”中的  　　，此步驟的目的是  　　         ，其中將血清白蛋白基因與調(diào)控組件結(jié)合時(shí)必須用到限制性核酸內(nèi)切酶和     　　    酶。

（4）實(shí)驗(yàn)步驟III中，進(jìn)行動(dòng)物早期胚胎的體外培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除了含有各種有機(jī)鹽類(lèi)、維生素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分外，還要添加  　　  和動(dòng)物血清。

（5）實(shí)驗(yàn)步驟IV中，應(yīng)選擇性別為 　　  的奶牛胚胎進(jìn)行移植。請(qǐng)舉出一種人工控制或篩選胚胎性別的方法：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

（6）若需迅速得到大量轉(zhuǎn)基因奶牛，現(xiàn)有兩種處理方法：

方法A：在步驟IV中將早期胚胎分離成若干個(gè)胚胎細(xì)胞，讓其分別發(fā)育成一頭小牛。進(jìn)行上述操作時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育至  　　　　  階段的胚胎進(jìn)行操作，分割時(shí)必須注意要將早期胚胎中的  　　　　  均等分割。

方法B：在步驟IV中將早期胚胎細(xì)胞的細(xì)胞核移植到普通黃牛的  　　  細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成新胚胎。為獲得大量可供移植的胚胎細(xì)胞核，可將早期胚胎細(xì)胞分離出來(lái)，在添加了抑制因子的培養(yǎng)液中，將其培養(yǎng)成能夠增殖而不發(fā)生分化的   　　   細(xì)胞，再?gòu)脑摷?xì)胞中提取所需的細(xì)胞核。

上述兩種方法中，最能保持步驟IV中早期胚胎細(xì)胞遺傳特征的是方法  　　  。

Answer 1

（1）①用促性腺激素處理良種母牛（使其超數(shù)排卵）  

②從屠宰場(chǎng)已屠宰母牛的卵巢中采集、培養(yǎng)   

（2）獲能  透明帶

（3）顯微注射技術(shù)　　基因表達(dá)載體的構(gòu)建  　使人血清白蛋白基因能夠在奶牛乳腺細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可遺傳給下一代。同時(shí)能夠表達(dá)和發(fā)揮作用      DNA連接

（4）激素    

（5）雌性

①X精子與Y精子分離技術(shù)（選擇X型精子進(jìn)行體外受精）  

②顯微鏡鏡檢法（利用顯微鏡觀察胚胎細(xì)胞性染色體確定胚胎性別）   

③SRY—PCR胚胎的性別鑒定技術(shù)［利用SRY基因（Y染色體上的性別決定基因）作為探針，對(duì)胚胎細(xì)胞的DNA進(jìn)行檢測(cè)］

（6）桑椹胚或囊胚    內(nèi)細(xì)胞團(tuán)  　去核卵母  　胚胎干 　　A