Question

【題目】佩戴口罩是預(yù)防病原體感染的有效措施。某研究小組對(duì)非滅菌的一次性口罩中的微生物進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)分析微生物的種類(lèi)和數(shù)量來(lái)確定口罩的合格性�；卮鹣铝袉�(wèn)題。

（1）從包裝中取樣，準(zhǔn)確稱(chēng)取10g(近似10mL)樣品。剪碎后加入到90ml滅菌生理鹽水中，充分混勻，得到一個(gè)生理鹽水樣液。待上述生理鹽水樣液自然沉降后取上清液作菌落計(jì)數(shù)。取4個(gè)培養(yǎng)基，進(jìn)行____滅菌處理，待冷卻后采用____法分別接種0．1ml樣液，放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)分別為31、42、356和35，那么1g口罩樣品中細(xì)菌數(shù)量為____。根據(jù)《中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》對(duì)非滅菌一次性口罩的微生物指標(biāo)要求（如表），該研究小組檢測(cè)的口罩_________（填是或否）合格�？谡治⑸�物指標(biāo)

細(xì)菌菌落總數(shù) CFU/g	大腸桿菌	綠膿桿菌	金黃色葡萄球菌	濃血性鏈球菌	真菌
≤100	不得檢出	不得檢出	不得檢出	不得檢出	不得檢出

（2）為確定檢測(cè)樣液中大腸桿菌數(shù)目，需在培養(yǎng)基中加入______用于鑒別，統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基上____（顏色）菌落的數(shù)目。

（3）若要對(duì)口罩中的金黃色葡萄球菌進(jìn)行檢測(cè)，將樣液接種到甘露醇高鹽瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)，此培養(yǎng)基屬于____培養(yǎng)基。培養(yǎng)一段時(shí)間后，該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜止培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是_________

Answer 1

【答案】高壓蒸汽 稀釋涂布平板否 3600 否 伊紅美藍(lán) （紫）黑色 選擇 振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，同時(shí)可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率

【解析】

1、微生物常見(jiàn)的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)；在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

2、培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基：

①選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物生長(zhǎng)，培養(yǎng)、分離出特定的微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽）；

②鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，鑒別不同種類(lèi)的微生物，如可用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）。

（1）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌應(yīng)該使用高壓蒸汽滅菌處理。接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可用于微生物的計(jì)數(shù)，因此該小組采用稀釋涂布平板法接種，以檢測(cè)樣液中的細(xì)菌含量。培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落數(shù)分別為31、42、356和35，其中培養(yǎng)基中菌落數(shù)為356的一組與其他組數(shù)量差別太大，且不在30~300之間，需要舍棄，所以培養(yǎng)基上平均菌落數(shù)為（31+42+35）/3=36，且由于對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)為10，樣液為0.1mL，故每克樣品中細(xì)菌數(shù)量為36/0.1×10=3600。根據(jù)題意可知，1g樣品中細(xì)菌菌落總數(shù)不高于100才算合格，因此該研究小組檢測(cè)的口罩是不合格的。

（2）檢測(cè)樣液中大腸桿菌數(shù)目，需接種于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基培養(yǎng)，在該培養(yǎng)基上大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)（紫）黑色，可根據(jù)培養(yǎng)基上（紫）黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算出樣液中大腸桿菌的數(shù)目。

（3）金黃色葡萄球菌可以在高鹽環(huán)境中生存，因此在培養(yǎng)基中添加高濃度氯化鈉可以對(duì)金黃色葡萄球菌進(jìn)行選擇，屬于選擇培養(yǎng)基。振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的溶解氧的含量，同時(shí)可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此，振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜止培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。