Question

9．隨著全球環(huán)境污染嚴重，石油資源逐步減少，近年來乙醇等“綠色能源”的開發(fā)備受關注．科技工作者研制出利用秸稈生產(chǎn)燃料酒精的技術，大致流程如圖所示．

（1）若要從土壤中分離出能分解植物秸稈的微生物，培養(yǎng)基中的碳源是纖維素，對該培養(yǎng)基可采取的高壓蒸汽滅菌法方法進行滅菌．
（2）某同學對分離得到的微生物培養(yǎng)液進行數(shù)量測定，在稀釋倍數(shù)為10⁵對應的培養(yǎng)基中測定平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，則每毫升樣品中的細菌數(shù)是1.17×10⁷（涂布平板時稀釋液的體積為0.2mL）．
（3）用上述方法測定目的菌的密度，實際活菌數(shù)量要比測得的菌落數(shù)量多，原因是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落．
（4）上述流程圖中，糖液發(fā)酵產(chǎn)生酒精需要的菌種是酵母菌，酒精是在目的菌的細胞質基質（結構）中產(chǎn)生的．

Answer 1

分析 用植物秸稈生產(chǎn)酒精是利用微生物進行發(fā)酵的過程．植物秸稈中的有機物主要是纖維素，纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶能將其水解成葡萄糖．從土壤中分離纖維素分解菌的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．篩選纖維素分解菌必須使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，并且需要做產(chǎn)纖維素酶發(fā)酵葡萄糖的實驗進行酶活性的檢測．

解答 解：（1）篩選目的微生物需要使用選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的碳源為纖維素，培養(yǎng)基需要進行高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（2）根據(jù)題意可知，每毫升樣品中的菌落數(shù)是23.4×10⁵÷0.2=1.17×10⁷．
（3）用稀釋涂布平板法進行微生物計數(shù)時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落，所以實際活菌數(shù)量要比測得的菌落數(shù)量多．
（4）上述流程圖中，發(fā)酵階段需要的菌種是酵母菌，酵母菌無氧呼吸可以產(chǎn)生酒精，生產(chǎn)酒精要控制的必要條件是無氧，無氧呼吸的場所是細胞質基質．
故答案為：
（1）纖維素     高壓蒸汽滅菌法
（2）1.17×10⁷
（3）當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落
（4）酵母菌      細胞質基質

點評 本題主要考查纖維素分解菌的篩選和發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶分解葡萄糖的實驗，意在強化學生對相關知識點的識記與理解．