【題目】為了增加油菜種子的含油量,研究人員嘗試將酶D基因與轉(zhuǎn)運肽基因相連,一起導(dǎo)入油菜細(xì)胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。
(1)研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計引物,采用__________法快速擴(kuò)增從陸地棉基因文庫中獲取到的酶D基因和從擬南芥基因文庫中獲取到的轉(zhuǎn)運肽基因。所含三種限制酶(ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ)的切點如圖所示,則用______酶和______酶處理兩個基因后,可得到_____端與_____端(填圖中字母)相連的融合基因。
(2)將上述融合基因插入如圖所示Ti質(zhì)粒的T—DNA中,構(gòu)建_________________________并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含__________的固體平板上培養(yǎng)得到含融合基因的單菌落,再利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng),可以得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液。
(3)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間,此過程的目的是_______,進(jìn)一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞,該細(xì)胞通過________技術(shù),可培育成轉(zhuǎn)基因油菜植株。
(4)用________技術(shù)可檢測轉(zhuǎn)基因油菜植株中的融合基因是否成功表達(dá)。
【答案】PCR ClaⅠ DNA連接 A D 基因表達(dá)載體(或“重組質(zhì)粒”) 四環(huán)素 利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞 植物組織培養(yǎng) 抗原-抗體雜交
【解析】
基因工程的基本操作程序:
第一步:目的基因的獲取
1、原核基因采取直接分離獲得,真核基因是人工合成;
2、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因;
第二步:基因表達(dá)載體的構(gòu)建
第三步:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等。
將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞:最常用的方法是顯微注射技術(shù);
將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:用Ca2+處理。原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少,最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌。
第四步:目的基因的檢測和表達(dá)。
(1)目的基因的擴(kuò)增采用PCR技術(shù);由于酶D基因和轉(zhuǎn)運肽基因都有ClaⅠ限制酶切位點,所以可以用ClaⅠ限制酶和DNA連接酶處理兩個基因后,得到A、D端相連的融合基因。
(2)將上述融合基因插入圖乙所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中,構(gòu)建表達(dá)載體即重組質(zhì)粒并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落,再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng),可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。
(3)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間,此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞,進(jìn)一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞。該細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)技術(shù),可培育成轉(zhuǎn)基因油菜植株。
(4)用抗原-抗體雜交法可檢測轉(zhuǎn)基因油菜植株中的融合基因是否成功表達(dá)。
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【題目】如圖為某家族兩種遺傳病系譜圖,其中有一種遺傳病為紅綠色盲,甲病基因用A、a表示,乙病基因用B、b表示。下列相關(guān)敘述錯誤的是( )
A.甲病為常染色體顯性遺傳病
B.若Ⅲ5為正常女性,基因型是aaXBXb或aaXBXB
C.Ⅲ1與正常男性結(jié)婚,子女患病的可能性是1/4
D.若Ⅲ5為XXY型紅綠色盲個體,最可能由Ⅱ3減數(shù)第一次分裂后期染色體分配異常引起的
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【題目】某植物細(xì)胞能利用質(zhì)子泵(轉(zhuǎn)運H+的載體)把胞內(nèi)的H+泵出,使胞外H+濃度高于胞內(nèi);H+-蔗糖載體能夠依靠膜兩側(cè)的H+濃度差把H+和蔗糖分子一同運入細(xì)胞(如圖)。下列說法正確的是( )
A.H+進(jìn)出該植物細(xì)胞的跨膜運輸方式相同
B.H+-蔗糖載體跨膜運輸物質(zhì)時沒有特異性
C.O2濃度對該細(xì)胞運輸蔗糖的速率無影響
D.H+-蔗糖載體能夠?qū)⒄崽悄鏉舛忍荻冗\輸
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【題目】下圖表示某原核生物DNA片段上的1個啟動部位和3個基因的排列順序及基因的表達(dá)過程,其中①②代表能與啟動部位(P)結(jié)合的酶,正發(fā)生左→右移動。
下列敘述錯誤的是( )
A.圖中①②均為RNA聚合酶,能催化DNA雙螺旋解開
B.圖中①②與啟動部位結(jié)合,均可啟動3個基因的轉(zhuǎn)錄
C.圖中有3個核糖體同時在翻譯,其移動方向是左→右
D.圖中3條多肽合成結(jié)束后,它們的氨基酸序列相同
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【題目】最先是在一玉米田堆放的有機(jī)肥中檢測到放射性,施肥后在玉米體內(nèi)檢測到了放射性,隨后在田間小動物玉米螟、狼蛛、螞蟻(分解者)體內(nèi)檢測到放射性情況如下圖所示。
請回答:
(1)若放射性來自某一種元素,則可能是______(填“15N”或“32P”)。該有機(jī)肥中的放射性物質(zhì)進(jìn)入玉米體內(nèi)的具體途徑是_______。題中的一條食物鏈為_______。
(2)圖中甲代表的動物是________,它屬于第_______個營養(yǎng)級。丙代表的動物體內(nèi)最遲才出現(xiàn)放射性的原因是_______。該放射性元素自身衰減需要漫長的時間,然而,曲線顯示三種動物體內(nèi)的放射性強(qiáng)度都很快降低,其降低的最可能原因是_______。
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【題目】為研究低氧脅迫對青瓜品種根系細(xì)胞呼吸的影響,某研究小組用A、B兩個青瓜品種進(jìn)行實驗研究。圖示結(jié)果為一周后測得的根系中乙醇的含量;卮鹣铝袉栴}:
(1)由圖中信息可推出,正常通氣情況下,青瓜品種A、B的根系細(xì)胞呼吸作用產(chǎn)生的來自于________(填細(xì)胞結(jié)構(gòu)的名稱)。
(2)實驗結(jié)果表明,青瓜品種________對氧氣濃度的變化較為敏感,直接原因是該品種根系細(xì)胞中與無氧呼吸有關(guān)的酶含量較高,根本原因是________。
(3)根系長期處于低氧環(huán)境中,青瓜吸收無機(jī)鹽的能力會下降,根系可能變黑、腐爛,原因分別是________、________。
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【題目】在模擬孟德爾雜交實驗中,從下圖所示的松緊袋中隨機(jī)抓取一個小球并作相關(guān)記錄,每次將抓取的小球分別放回原松緊袋中,重復(fù)100次。下列敘述正確的是( )
A.該實驗?zāi)M親本產(chǎn)生F1的過程中,等位基因分離,非同源染色體上的非等位基因自由組合
B.上述四個袋子中所裝的小球數(shù)量必須相等
C.從①③或②④中隨機(jī)抓取一個小球并組合,模擬非同源染色體上的非等位基因自由組合
D.若①代表一個雌性個體的生殖器官,則③代表另一個雌性個體的生殖器官
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【題目】圖是反射弧的模式圖, d是神經(jīng)末梢與肌細(xì)胞的接觸部位類似于突觸,稱為“神經(jīng)—肌肉接頭”。下列敘述正確的是
A. 神經(jīng)纖維上興奮的傳導(dǎo)方向與膜內(nèi)的電流方向相反
B. 電刺激a處,會導(dǎo)致肌肉收縮,該過程屬于反射
C. 電刺激b處,神經(jīng)纖維上的電流計c會偏轉(zhuǎn)兩次
D. 興奮傳至“神經(jīng)—肌肉接頭”處可發(fā)生信號的轉(zhuǎn)變
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【題目】單倍體育種通常要用到花藥離體培養(yǎng)。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖,下列敘述正確的是( )
A.為了防止微生物污染,過程①所用的花藥需在體積分?jǐn)?shù)為70%乙醇中浸泡30 min
B.過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化
C.過程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上
D.過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體
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