Question

【題目】請(qǐng)回答下列有關(guān)基因工程及其應(yīng)用的問題：

（1）多種限制酶和DNA連接酶，以及_________酶的發(fā)現(xiàn)，為DNA的切割、連接以及功能基因的獲得創(chuàng)造了條件。

（2）基因工程的核心步驟是_________；重組Ti質(zhì)粒載體結(jié)構(gòu)中T-DNA的作用是_________________。

（3）科學(xué)家設(shè)法使煙草細(xì)胞形成微創(chuàng)傷，受傷部位細(xì)胞產(chǎn)生的乙酰丁香酮可吸引農(nóng)桿菌向受傷部位集中，這時(shí)農(nóng)桿菌攜帶某種目的基因進(jìn)入煙草細(xì)胞。獲得的轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞通過_________技術(shù)最終獲得轉(zhuǎn)基因煙草，檢測(cè)煙草細(xì)胞是否成功導(dǎo)入該目的基因的方法是_________。

（4）利用_____________處理植物體細(xì)胞可得到原生質(zhì)體，將目的基因?qū)�入原生質(zhì)體的方法中，除題（3）所述方法外，還可采用_________。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄 構(gòu)建基因表達(dá)載體 攜帶目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞并整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上 植物組織培養(yǎng) DNA分子雜交技術(shù) 纖維素酶和果膠酶 基因槍法

【解析】

基因工程的基本工具是：限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體；基因工程的基本步驟是：目的基因的獲取、構(gòu)建基因表達(dá)載體、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。

（1）切割目的基因需要用限制酶、將目的基因與運(yùn)載體相連需要用到DNA連接酶，而利用反轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶。

（2）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體；重組Ti質(zhì)粒載體結(jié)構(gòu)中T-DNA為可轉(zhuǎn)移DNA，可以攜帶目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞并整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上。

（3）將獲得的轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞最終培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因煙草需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)；檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入煙草細(xì)胞可以采用DNA分子雜交技術(shù)。

（4）植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因此利用纖維素酶和果膠酶處理植物體細(xì)胞可得到原生質(zhì)體；將目的基因?qū)�入原生質(zhì)體的方法中，除了利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，還可以利用基因槍法。