(14分)綠色熒光蛋白基因(GFP)被發(fā)現(xiàn)以來,一直作為一個監(jiān)測完整細胞和組織內(nèi)基因表達及蛋白質位置的理想標記。請根據(jù)圖表回答下列問題。
(1)若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是—TCGA,N端伸出的核苷酸的堿基序列是—TGCA,則在構建含該GFP的重組質粒A時,應選用的限制酶是 。③過程需要的酶是 。
(2)檢測GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的染色體DNA上,可采用 技術進行檢測。
(3)用顯微鏡可觀察到用于⑥過程的豬卵母細胞的卵黃膜和透明帶之間有 個極體。用于⑤過程的豬胎兒成纖維細胞,一般選用傳代10代以內(nèi)的細胞,原因是 。
(4)由⑦過程獲得的重組細胞培育成綠色熒光轉基因克隆豬,涉及到的現(xiàn)代生物技術手段有 。
(5)為了加快繁殖速度,可采用胚胎分割的方法。得到綠色熒光轉基因克隆豬(雌性)之后,可用 處理,使之超數(shù)排卵,提高其繁育能力。
科目:高中生物 來源: 題型:
我國科學家發(fā)現(xiàn),彎曲的蠶絲由于彎折處容易斷裂,其強度低于由蜘蛛紡績器拖牽絲的直絲,并首次在世界上通過轉基因方法將“綠色熒光蛋白基因”和“蜘蛛拖牽絲基因”拼接成功插入蠶絲基因組中,并在受體細胞中得到成功表達。
(1)這項基因工程的操作中,目的基因是 ,綠色熒光蛋白基因的主要目的是 。
(2)在基因工程中,若選出的目的基因共1000個脫氧核苷酸對,其中腺嘌呤脫氧核苷酸有460個,放入DNA擴增儀中擴增4代,那么,在擴增儀中放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個數(shù)至少應是 個。
(3)若限制性內(nèi)切酶A的識別序列和切點是—G↓GATCC—,限制性內(nèi)切酶B的識別序列和切點是—↓GATC—。則限制性內(nèi)切酶A切割質粒形成的黏性末端是 ,若在DNA連接酶的作用下,上述兩種限制性內(nèi)切酶切割后形成的黏性末端是否能夠連接 。
(4)下列關于生物工程中酶的作用的敘述中,錯誤的是( )
A.纖維素酶可用于植物體細胞雜交
B.胰蛋白酶可用于動物細胞培養(yǎng)
C.限制性內(nèi)切酶只能用于提取目的基因
D.DNA連接酶只能用于DNA的拼接重組
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科目:高中生物 來源:2011-2012學年廣東省連州市連州中學高二下學期期中考試生物試卷(帶解析) 題型:綜合題
日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻,獲得2008年度諾貝爾化學獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉基因克隆豬的培育過程示意圖。據(jù)圖回答:
(1)圖中通過過程①、②形成重組質粒,需要限制性核酸內(nèi)切酶切取目的基因、切割質粒。限制性核酸內(nèi)切酶I的識別序列和切點是—G↓GATCC—,請畫出質粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端:__________________________________________________。
(2)過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞時,采用最多也最有效的方法是________________________________。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上,GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因,其作用是______________________________。
(4)目前科學家們通過蛋白質工程制造出了藍色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等,采用蛋白質工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是(用數(shù)字表示)________________________。
①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列
③藍色熒光蛋白基因的修飾(合成)
④表達出藍色熒光蛋白
(5)若要在體外擴增綠色熒光蛋白基因可采用PCR技術。標準的PCR過程分為三個步驟,第一步是“變性”,這一步驟如果發(fā)生在細胞內(nèi),是在 的作用下完成的;第二步是退火;第三步是“延伸”,需要用到 酶。
(6)以上培育過程中應用到的生物技術有_________________________________________等。(至少答出三項)
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科目:高中生物 來源:2011屆上海市嘉定區(qū)高三上學期第一次質量調研生物試卷 題型:綜合題
分析回答有關生物工程中的問題:(8分)
日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻,獲得2008年度諾貝爾化學獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉基因克隆豬的培育過程示意圖.據(jù)圖回答:
(1)綠色熒光蛋白基因在該實驗中是做為________基因。圖中通過過程①、②形成重組質粒,需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質粒。限制性內(nèi)切酶I的識別序列和切點是—G’GATCC—,請畫出質粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的過程:________________________
_________。
(2)過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞時,采用最多也最有效的方法是_______________ ___。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上,GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因,其作用是_______________________。
(4)目前科學家們通過蛋白質工程制造出了藍色熒光蛋白,黃色熒光蛋白等,采用蛋白質工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是(用數(shù)字表示):_______ ___ 。
①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計③藍色熒光蛋白基因的修飾(合成)④表達出藍色熒光蛋白。
(5)在培養(yǎng)重組細胞時,培養(yǎng)液中通常含有_____________、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。
(6)以上培育過程中應用到的生物技術有_________________________________等(至少答出三項)。
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科目:高中生物 來源:2013屆廣東省連州市高二下學期期中考試生物試卷(解析版) 題型:綜合題
日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻,獲得2008年度諾貝爾化學獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉基因克隆豬的培育過程示意圖。據(jù)圖回答:
(1)圖中通過過程①、②形成重組質粒,需要限制性核酸內(nèi)切酶切取目的基因、切割質粒。限制性核酸內(nèi)切酶I的識別序列和切點是—G↓GATCC—,請畫出質粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端:__________________________________________________。
(2)過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞時,采用最多也最有效的方法是________________________________。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上,GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因,其作用是______________________________。
(4)目前科學家們通過蛋白質工程制造出了藍色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等,采用蛋白質工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是(用數(shù)字表示)________________________。
①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列
③藍色熒光蛋白基因的修飾(合成)
④表達出藍色熒光蛋白
(5)若要在體外擴增綠色熒光蛋白基因可采用PCR技術。標準的PCR過程分為三個步驟,第一步是“變性”,這一步驟如果發(fā)生在細胞內(nèi),是在 的作用下完成的;第二步是退火;第三步是“延伸”,需要用到 酶。
(6)以上培育過程中應用到的生物技術有_________________________________________等。(至少答出三項)
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科目:高中生物 來源:2010-2011學年上海市嘉定區(qū)高三上學期第一次質量調研生物試卷 題型:綜合題
分析回答有關生物工程中的問題:(8分)
日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻,獲得2008年度諾貝爾化學獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉基因克隆豬的培育過程示意圖.據(jù)圖回答:
(1)綠色熒光蛋白基因在該實驗中是做為________基因。圖中通過過程①、②形成重組質粒,需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質粒。限制性內(nèi)切酶I的識別序列和切點是—G’GATCC—,請畫出質粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的過程:________________________
_________。
(2)過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞時,采用最多也最有效的方法是_______________ ___。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上,GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因,其作用是_______________________。
(4)目前科學家們通過蛋白質工程制造出了藍色熒光蛋白,黃色熒光蛋白等,采用蛋白質工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是(用數(shù)字表示):_______ ___ 。
①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計③藍色熒光蛋白基因的修飾(合成)④表達出藍色熒光蛋白。
(5)在培養(yǎng)重組細胞時,培養(yǎng)液中通常含有_____________、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。
(6)以上培育過程中應用到的生物技術有_________________________________等(至少答出三項)。
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