Question

【題目】熒光原位雜交可用熒光標(biāo)記的特異DNA片段為探針，與染色體上對應(yīng)的DNA片段結(jié)合，從而將特定的基因在染色體上定位。請回答下列問題：

（1）DNA熒光探針的制備過程如圖1所示，DNA酶I隨機(jī)切開了核苷酸之間的________鍵，從而產(chǎn)生切口，以熒光標(biāo)記的________為原料，在酶X________（DNA聚合酶/DNA連接酶）的作用下，合成熒光標(biāo)記的DNA探針。酶X的作用是________。

（2）圖2表示探針與待測基因結(jié)合的原理。先將探針與染色體共同煮沸，使DNA雙鏈中________鍵斷裂，形成單鏈。隨后在降溫復(fù)性過程中，探針的堿基按照________原則，與染色體上的特定基因序列形成較穩(wěn)定的雜交分子，圖中兩條姐妹染色單體中最多可有________條熒光標(biāo)記的DNA片段。

Answer 1

【答案】磷酸二酯 脫氧核苷酸 DNA聚合酶 將游離的脫氧核苷酸聚合成脫氧核苷酸鏈 氫 堿基互補(bǔ)配對 4

【解析】

基因探針是用放射性同位素、熒光分子等標(biāo)記的DNA分子作為探針，原理是DNA分子雜交。DNA分子具有獨(dú)特的雙螺旋結(jié)構(gòu)，是由兩條平行的脫氧核苷酸長鏈盤旋而成，外側(cè)由脫氧核糖和磷酸交替連接構(gòu)成基本骨架，內(nèi)側(cè)是堿基對（A-T；C-G）通過氫鍵連接。

（1）根據(jù)題意和圖示分析可知：DNA酶Ⅰ隨機(jī)切開了核苷酸之間的磷酸二酯鍵從而產(chǎn)生切口，形成DNA分子片段，在DNA聚合酶作用下，以熒光標(biāo)記的四種脫氧核苷酸為原料，合成脫氧核苷酸鏈。

（2）DNA分子是雙鏈結(jié)構(gòu)，通過氫鍵連接．將探針與染色體共同煮沸，使DNA雙鏈中氫鍵斷裂，形成單鏈，隨后在降溫復(fù)性過程中，探針的堿基按照A-T、C-G的堿基互補(bǔ)配對原則，與染色體上的特定基因序列形成較穩(wěn)定的雜交分子，圖中兩條姐妹染色單體中含有2個(gè)DNA分子共有4條鏈，所以最多可有4條熒光標(biāo)記的DNA片段。