Question

【題目】研究發(fā)現(xiàn)，胃癌細胞與正常細胞相比，高爾基體上P115蛋白（囊泡轉(zhuǎn)運蛋白）含量顯著提高。為進一步確定P115與胃癌細胞增殖的關(guān)系，研究人員展開系列實驗。

材料用具：胃癌細胞株，細胞培養(yǎng)液，含有P115-shRNA的表達載體（P115-shRNA可使P115基因沉默），空質(zhì)粒，蛋白檢測裝置，血細胞計數(shù)板，顯微鏡、二氧化碳培養(yǎng)箱等實驗思路及

（1）將未導(dǎo)入質(zhì)粒和導(dǎo)入空質(zhì)粒的胃癌細胞株，編號為1號組、2號組，再設(shè)計一組________________作為3號組。成功轉(zhuǎn)染后，將三組細胞放在培養(yǎng)液中，檢測三組P115蛋白相對含量，結(jié)果如上圖。其中屬于實驗組P115蛋白含量的是________________。

（2）將三組細胞及培養(yǎng)液放在________中，適宜條件下培養(yǎng)一段時間，實驗開始及每隔24h測定各組細胞數(shù)量相對值。請畫出用于記錄各組72h內(nèi)細胞數(shù)量相對值的三線表________。

（3）72小時后，進一步測定三個組處于細胞周期各時期細胞數(shù)，計算百分比，結(jié)果如下圖。

由上圖可知P115-shRNA通過________________來抑制胃癌細胞的增殖。

（4）結(jié)合上述研究，提出治療胃癌的思路________________。

（5）體內(nèi)的胃癌細胞的清除主要依賴________________免疫。而在該免疫過程中，加入佐劑S能使抗原在吞噬細胞中停留的時間延長。綜合上述研究，推測佐劑S通過________________，加強機體對胃癌細胞的免疫應(yīng)答。

Answer 1

【答案】含有P115-shRNA的表達載體 c 二氧化碳培養(yǎng)箱 P115與胃癌細胞增殖的關(guān)系研究中細胞數(shù)目相對值的結(jié)果記錄表 抑制DNA分子復(fù)制（或阻滯細胞從G1期進入S期） 降低P115蛋白的含量（使P115蛋白的基因沉默；抑制P115蛋白基因的表達使用能夠抵消P115蛋白作用的藥物；使用能夠阻止胃癌細胞進入S期的藥物） 細胞 使抗原在吞噬細胞中停留時間增加，有利于抗原的處理和呈遞，促進T細胞的活化

【解析】

根據(jù)題意“胃癌細胞與正常細胞相比，高爾基體上P115蛋白（囊泡轉(zhuǎn)運蛋白）含量顯著提高”，說明P115蛋白與癌細胞的增殖有關(guān)，若抑制P115蛋白基因表達，則該蛋白含量減少，癌細胞的增殖受抑制。

（1）根據(jù)題意可知，本實驗是確定P115與胃癌細胞增殖的關(guān)系，自變量為是否有P115，已知P115-shRNA可使P115基因沉默，即能使P115基因不表達，為了排除質(zhì)粒對實驗結(jié)果的影響，還應(yīng)該設(shè)置一組導(dǎo)入空質(zhì)粒的做對照，故實驗組和對照組的處理為：將未導(dǎo)入質(zhì)粒和導(dǎo)入空質(zhì)粒的胃癌細胞株，編號為1號組、2號組，再設(shè)計一組含有P115-shRNA的表達載體作為3號組。成功轉(zhuǎn)染后，將三組細胞放在培養(yǎng)液中，檢測三組P115蛋白相對含量，結(jié)果如圖一。由于P115-shRNA可使P115基因沉默，即細胞不含P115，所以圖中屬于實驗組P115蛋白含量的是c。

（2）將三組細胞及培養(yǎng)液放在二氧化碳培養(yǎng)箱中，適宜條件下培養(yǎng)一段時間，實驗開始及每隔24h測定各組細胞數(shù)量相對值,用于記錄各組72h內(nèi)細胞數(shù)量相對值的三線表為：

（3）根據(jù)柱形圖可知，1號組和2號組中的S期細胞數(shù)比例相等，但均大于3號組，1號組和2號組中的G1期細胞數(shù)比例相等，但均小于3號組，三組的DNA復(fù)制后期～分裂期細胞數(shù)比例均相等，說明P115-shRNA通過抑制DNA分子復(fù)制來抑制胃癌細胞的增殖。

（4）由題圖研究可以推測，治療胃癌的思路是：降低P115蛋白的含量；使P115蛋白的基因沉默；抑制P115蛋白基因的表達；使用能夠抵消P115蛋白作用的藥物；使用能夠阻止胃癌細胞進入S期的藥物等均能抑制癌細胞的增殖。

（5）體內(nèi)的胃癌細胞的清除主要依賴細胞免疫。而在該免疫過程中，加入佐劑S能使抗原在吞噬細胞中停留的時間延長，推測佐劑S通過使抗原在吞噬細胞中停留時間增加，有利于抗原的處理和呈遞，促進T細胞的活化，加強機體對胃癌細胞的免疫應(yīng)答。