Question

16．如圖表示以雞血為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的操作程序，請分析回答下列問題：

（1）步驟一中，向雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水并攪拌，可使雞血細(xì)胞破裂．
（2）步驟二中，過濾后收集含有DNA的濾液．
（3）步驟三、四的操作原理是DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同而去除雜質(zhì)，步驟四的主要操作是滴加蒸餾水并攪拌，當(dāng)觀察到溶液中絮狀物不再增加時(shí)，操作停止，過濾去除溶液中的雜質(zhì)．
（4）氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極小．為了進(jìn)一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性，步驟七的具體操作是將步驟六獲得的濾液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時(shí)間，吸取上清液，然后加入等體積的、冷卻的酒精，靜置2～3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．
（5）步驟八：DNA遇二苯胺試劑，沸水浴5min，冷卻后，溶液呈藍(lán)色．

Answer 1

分析 DNA粗提取和鑒定的過程：
（1）實(shí)驗(yàn)材料的選取：凡是含有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對較高的生物組織，成功的可能性更大．
（2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液：
動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，過濾后收集濾液即可．如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜．例如，提取洋蔥的DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液．
（3）去除濾液中的雜質(zhì)：
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA；方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同．
（4）DNA的析出與鑒定
①將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分．
②取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解．然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑．混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)．

解答 解：（1）步驟一中，利用滲透原理，向雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水并攪拌，可使雞血細(xì)胞破裂．
（2）步驟二中，過濾后收集含有DNA的濾液．
（3）步驟三、四的操作原理是DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；步驟四通過向溶液中加入蒸餾水可降低DNA的溶解度，使DNA析出，當(dāng)觀察到溶液中絮狀物不再增加時(shí)，停止操作，過濾去除溶液中的雜質(zhì)．
（4）氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極�。疄榱诉M(jìn)一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性，步驟七的具體操作是將步驟六獲得的濾液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時(shí)間，DNA分布在上清液中，因此吸取上清液；然后加入等體積的冷卻的酒精，靜置2～3min，由于DNA不溶于酒精，因此溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．
（5）步驟七：DNA遇二苯胺試劑，沸水浴5min，冷卻后，溶液呈藍(lán)色．
故答案為：
（1）蒸餾水     
（2）濾液　  
（3）不同濃度的NaCl溶液 　絮狀物不再增加
（4）上清液　 酒精　
（5）二苯胺　藍(lán)

點(diǎn)評 本題考查DNA的粗提取和提純，對于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中注意積累．