Question

20．某研究小組進行藥物試驗時，以動物肝細胞為材料，測定藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性．供培養(yǎng)的細胞有甲、乙兩種，甲細胞為正常肝細胞，乙細胞為肝腫瘤細胞．請回答下列有關動物細胞培養(yǎng)的問題：
（1）將數量相等的甲細胞和乙細胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其它培養(yǎng)條件均相同．一段時間后，觀察到甲細胞數量比乙細胞數量少．
（2）在動物細胞培養(yǎng)應在含5%CO₂的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO₂的主要作用是維持細胞培養(yǎng)液的pH值．
（3）在兩種細胞培養(yǎng)過程中，當甲細胞鋪滿瓶壁時，會出現接觸抑制（停止分裂增殖）現象，若甲細胞傳代培養(yǎng)10-50代左右，發(fā)現增殖逐漸緩慢，以至于完全停止，這時部分細胞的遺傳物質（核型）可能會發(fā)生變化．藥物試驗需要大量細胞，兩種細胞頻繁傳代，甲細胞比乙細胞相比，可以傳代的次數更多的是乙細胞．若用動物的肝臟組織塊制備肝細胞懸液，需用胰蛋白酶消化處理．
（4）理論上，乙細胞可與某種B淋巴細胞融合成雜交瘤細胞，從而來制備單克隆抗體，使患者獲得特異性免疫．

Answer 1

分析 動物細胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．
培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．（2）營養(yǎng)物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質．（3）溫度和PH．（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的pH值）．

解答 解：（1）肝腫瘤細胞比正常肝細胞的分裂能力強，細胞周期短，因此在其他條件相同時，相同時間內肝腫瘤細胞產生的子代細胞多．
（2）細胞培養(yǎng)應在含有5%CO₂的恒溫培養(yǎng)箱中進行，其中CO₂的作用是維持培養(yǎng)液pH．
（3）在兩種細胞生長過程中，當甲細胞鋪滿瓶壁時，會出現停止現象，若甲細胞傳代培養(yǎng)10-50代左右，發(fā)現增殖逐漸緩慢，以至于完全停止，這時部分細胞的遺傳物質可能會發(fā)生變化．藥物試驗需要大量細胞，兩種細胞頻繁傳代，乙細胞比甲細胞相比，可以傳代的次數更多的是乙細胞．若用動物的肝臟組織塊制備肝細胞懸液，需用胰蛋白酶消化處理．
（4）理論上，乙細胞可與某種B淋巴細胞合成雜交瘤細胞，從而來制備單克隆抗體，使患者獲得特異性免疫．
故答案為：
（1）少
（2）維持細胞培養(yǎng)液的pH值
（3）接觸抑制（停止分裂增殖）  遺傳物質（核型）   乙   胰蛋白酶
（4）雜交瘤    單克隆抗體

點評 本題考查動物細胞培養(yǎng)的相關知識，要求考生識記動物細胞培養(yǎng)的過程及條件，掌握動物細胞培養(yǎng)技術的相關應用，能運用所學的知識準確判斷各選項，屬于考綱識記層次的考查．