Question

15．圖1是利用兩種不同生物技術(shù)將小鼠培育成大鼠的過程．圖2中質(zhì)粒是基因工程中常用的質(zhì)粒pIJ702，其中tsr為硫鏈絲菌素抗性基因，mel是黑色素合成基因，其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而限制酶ClaⅠ、BglⅡ、Pst I、SacⅠ、SphⅠ在pⅠJ702 上分別只有一處識別序列．

表1

	pIJ702	pZHZ8
BglⅡ	5.7kb	6.7kb
ClaⅠ	5.7kb	2.2kb，4.5kb
Pst I	5.7kb	1.6kb，5.1kb

（1）圖1中應用到的生物工程技術(shù)有核移植技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)等．c分子稱為達載體（重組DNA分子或重組質(zhì)粒），其上的生長激素基因表達產(chǎn)物的受體分布在丁鼠的全身細胞的細胞膜上．
（2）若大鼠甲和大鼠乙體內(nèi)X染色體上均帶有某種致病基因，則培育出的大鼠丙和大鼠丁攜帶致病基因的是（不考慮基因突變）大鼠丙攜帶，丁不攜帶．
（3）以SacⅠ和SphⅠ同時切割大鼠生長激素基因和質(zhì)粒PIJ702，獲取的目的基因去置換PIJ702上0.4kb的片段，構(gòu)成重組質(zhì)粒pZHZ8．上述兩種質(zhì)粒的限制酶酶切片段長度列在表1中．由此判斷目的基因的片段長度為1.4kb．參照表1數(shù)據(jù)，如果用PstⅠ和Cla l同時酶切重組質(zhì)粒pZHZ8，則兩種酶可將pZHZ8切成4個片段．
（4）重組質(zhì)粒pZHZ8上的標記基因是tsr基因（硫鏈絲菌素抗性基因），在含硫鏈絲菌素固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，篩選過程中要淘汰黑色的菌落．

Answer 1

分析 分析圖1：圖1是利用兩種不同生物技術(shù)將小鼠培育成大鼠的過程．Ⅰ采用了核移植技術(shù)；Ⅱ采用了基因工程技術(shù)，其中①表示基因表達載體的構(gòu)建過程，然后導入小鼠受精卵．

解答 解：（1）圖1中，技術(shù)Ⅰ采用了核移植、動物細胞培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)，技術(shù)Ⅱ采用了基因工程、動物細胞培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)．因此圖1中應用到的生物工程技術(shù)有核移植技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)等．c是構(gòu)建好的基因表達載體（重組DNA分子或重組質(zhì)粒）；生長激素基因表達產(chǎn)物為生長激素，其受體分布在丁鼠的全身細胞的細胞膜上．
（2）大鼠丙的細胞核遺傳物質(zhì)都來自大鼠甲，因此且攜帶致病基因；大鼠丁只導入了大鼠乙的一個基因，因此不攜帶致病基因．
（3）質(zhì)粒PIJ702的長度為5.7kb，而重組質(zhì)粒pZHZ8的長度為6.7kb，又已知構(gòu)建基因表達載體時，目的基因置換了PIJ702上0.4kb的片段，由此判斷目的基因的片段長度為6.7-5.7+0.4=1.4kb．用ClaⅠ切割質(zhì)粒PIJ702時只產(chǎn)生一種長度的DNA片段，但用該酶切割重組質(zhì)粒pZHZ8時能產(chǎn)生兩種長度的DNA片段，這說明目的基因中含有ClaⅠ的切割位點，同理目的基因中也含有PstⅠ的切割位點，即重組質(zhì)粒pZHZ8中含有2個PstⅠ酶切位點，也含有2個Cla l酶切位點．因此，用這兩種酶同時酶切重組質(zhì)粒pZHZ8時，可將pZHZ8切成4個片段．
（4）構(gòu)建基因表達載體時，破壞了mel（黑色素合成基因），但沒有破壞tsr（硫鏈絲菌素抗性基因），因此重組質(zhì)粒pZHZ8上的標記基因是tsr基因（硫鏈絲菌素抗性基因）；由于mel（黑色素合成基因）被破壞，含有重組質(zhì)粒的受體細胞不能表達產(chǎn)生黑色素，因此重組質(zhì)粒中的在含硫鏈絲菌素固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，篩選過程中要淘汰黑色的菌落．
故答案為：
（1）核移植技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、動物細菌培養(yǎng)技術(shù)等         達載體（重組DNA分子或重組質(zhì)粒）        細胞膜上
（2）大鼠丙攜帶，丁不攜帶
（3）1.4       4
（4）tsr基因（硫鏈絲菌素抗性基因）      黑

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能正確分析題圖，再運用圖中信息準確答題，屬于考綱理解和應用層次的考查，有一定難度．