Question

18．白細(xì)胞介素4（IL一4）是具有多種免疫學(xué)調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞因子，臨床及研究中需要大量高純度的IL一4，以及其高效檢測(cè)試劑．如圖是利用單克隆抗體技術(shù)制備抗IL一4特異性抗體的過(guò)程．回答相關(guān)問題：

（1）在免疫系統(tǒng)組成中，IL一4屬于免疫活性物質(zhì)．研究人員從外周血中提取到IL一4蛋白分子的mRNA，將其反轉(zhuǎn)錄成cDNA，構(gòu)建特定表達(dá)載體，利用工程菌獲得用于臨床及研究需要的高純度的IL一4蛋白．
（2）圖中所示的a培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的是骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞，其與M細(xì)胞融合產(chǎn)生雙核或多核細(xì)胞，再經(jīng)有絲分裂，進(jìn)一步形成兩個(gè)新的單核雜交細(xì)胞．
（3）b培養(yǎng)瓶所示過(guò)程中，要用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞篩選，得到的融合的雜種細(xì)胞能在體外培養(yǎng)增殖生長(zhǎng)．經(jīng)b獲得的細(xì)胞，還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)（克隆化培養(yǎng)和專一抗體陽(yáng)性檢測(cè)）．
（4）c培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的細(xì)胞是分泌抗IL-4抗體的雜交瘤細(xì)胞．制備IL一4單克隆抗體的過(guò)程中，細(xì)胞培養(yǎng)瓶通常置于特定培養(yǎng)箱中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，要求培養(yǎng)瓶松蓋，主要目的是讓氧氣進(jìn)入培養(yǎng)瓶以供細(xì)胞代謝、使二氧化碳加入培養(yǎng)瓶維持培養(yǎng)液的PH．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體制備流程：
（1）對(duì)小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)；
（2）得到相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；
（3）將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選；
（4）在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)（這種雜種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生專一的抗體）
（5）對(duì)上述雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足量的能分泌所需抗體的細(xì)胞；
（6）最后，將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，這樣，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的單克隆抗體．
2、分析圖示可知：M為具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞、a為骨髓瘤細(xì)胞，b過(guò)程為對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，c為將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)．

解答 解：（1）白細(xì)胞介素4（IL一4）是具有多種免疫學(xué)調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞因子．即在免疫系統(tǒng)組成中，IL一4屬于免疫活性物質(zhì)．對(duì)于真核基因而言，轉(zhuǎn)錄形成mRNA中遺傳信息來(lái)自于外顯子中的遺傳信息，所以將mRNA反轉(zhuǎn)錄形成的是 cDNA．
（2）分析圖可知：?jiǎn)慰寺】贵w由雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，由此可推出圖中所示的a中培養(yǎng)的是骨髓瘤細(xì)胞．其與M細(xì)胞（具有免疫能力的B淋巴）融合產(chǎn)生雙核或多核細(xì)胞，再經(jīng)有絲分裂，進(jìn)一步形成兩個(gè)新的單核雜交細(xì)胞．
（3）骨髓瘤細(xì)胞與M細(xì)胞（具有免疫能力的B淋巴）融合，需要篩選，即：b培養(yǎng)瓶中用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞篩選，選出雜交瘤細(xì)胞．但這個(gè)雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)（克隆化培養(yǎng)和專一抗體陽(yáng)性檢測(cè)），才可以得到能無(wú)限增殖并能產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（4）提取單克隆抗體可以體外提取，也可以體內(nèi)提取，c培養(yǎng)瓶所示是體外提取，即c培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的細(xì)胞是分泌抗IL-4抗體的雜交瘤細(xì)胞．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常置于特定培養(yǎng)箱中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，要求培養(yǎng)瓶松蓋，主要目的是讓氧氣進(jìn)入培養(yǎng)瓶以供細(xì)胞代謝、使二氧化碳加入培養(yǎng)瓶維持培養(yǎng)液的PH．
故答案為：
（1）免疫活性       cDNA
（2）骨髓瘤細(xì)胞      有絲分裂
（3）融合的雜種     克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)（克隆化培養(yǎng)和專一抗體陽(yáng)性檢測(cè)）
（4）分泌抗IL-4抗體     讓氧氣進(jìn)入培養(yǎng)瓶以供細(xì)胞代謝、使二氧化碳加入培養(yǎng)瓶維持培養(yǎng)液的PH

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查人體免疫系統(tǒng)在維持穩(wěn)態(tài)中的作用、單克隆抗體的制備，要求考生識(shí)記人體免疫系統(tǒng)的組成，掌握體液免疫和細(xì)胞免疫的具體過(guò)程；識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，能結(jié)合圖中和題中信息答題．