Question

18．白細胞介素4（IL一4）是具有多種免疫學調(diào)節(jié)功能的細胞因子，臨床及研究中需要大量高純度的IL一4，以及其高效檢測試劑．如圖是利用單克隆抗體技術制備抗IL一4特異性抗體的過程．回答相關問題：

（1）在免疫系統(tǒng)組成中，IL一4屬于免疫活性物質．研究人員從外周血中提取到IL一4蛋白分子的mRNA，將其反轉錄成cDNA，構建特定表達載體，利用工程菌獲得用于臨床及研究需要的高純度的IL一4蛋白．
（2）圖中所示的a培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的是骨髓瘤細胞細胞，其與M細胞融合產(chǎn)生雙核或多核細胞，再經(jīng)有絲分裂，進一步形成兩個新的單核雜交細胞．
（3）b培養(yǎng)瓶所示過程中，要用特定的選擇性培養(yǎng)基進行細胞篩選，得到的融合的雜種細胞能在體外培養(yǎng)增殖生長．經(jīng)b獲得的細胞，還需要進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測（克隆化培養(yǎng)和專一抗體陽性檢測）．
（4）c培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的細胞是分泌抗IL-4抗體的雜交瘤細胞．制備IL一4單克隆抗體的過程中，細胞培養(yǎng)瓶通常置于特定培養(yǎng)箱中進行細胞培養(yǎng)，要求培養(yǎng)瓶松蓋，主要目的是讓氧氣進入培養(yǎng)瓶以供細胞代謝、使二氧化碳加入培養(yǎng)瓶維持培養(yǎng)液的PH．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體制備流程：
（1）對小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠產(chǎn)生免疫反應；
（2）得到相應的B淋巴細胞；
（3）將小鼠骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選；
（4）在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜種細胞才能生長（這種雜種細胞的特點是既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生專一的抗體）
（5）對上述雜交瘤細胞還需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足量的能分泌所需抗體的細胞；
（6）最后，將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，這樣，從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的單克隆抗體．
2、分析圖示可知：M為具有免疫能力的B淋巴細胞、a為骨髓瘤細胞，b過程為對雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，c為將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)．

解答 解：（1）白細胞介素4（IL一4）是具有多種免疫學調(diào)節(jié)功能的細胞因子．即在免疫系統(tǒng)組成中，IL一4屬于免疫活性物質．對于真核基因而言，轉錄形成mRNA中遺傳信息來自于外顯子中的遺傳信息，所以將mRNA反轉錄形成的是 cDNA．
（2）分析圖可知：單克隆抗體由雜交瘤細胞產(chǎn)生的，由此可推出圖中所示的a中培養(yǎng)的是骨髓瘤細胞．其與M細胞（具有免疫能力的B淋巴）融合產(chǎn)生雙核或多核細胞，再經(jīng)有絲分裂，進一步形成兩個新的單核雜交細胞．
（3）骨髓瘤細胞與M細胞（具有免疫能力的B淋巴）融合，需要篩選，即：b培養(yǎng)瓶中用特定的選擇性培養(yǎng)基進行細胞篩選，選出雜交瘤細胞．但這個雜交瘤細胞還需要進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測（克隆化培養(yǎng)和專一抗體陽性檢測），才可以得到能無限增殖并能產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細胞．
（4）提取單克隆抗體可以體外提取，也可以體內(nèi)提取，c培養(yǎng)瓶所示是體外提取，即c培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的細胞是分泌抗IL-4抗體的雜交瘤細胞．動物細胞培養(yǎng)通常置于特定培養(yǎng)箱中進行細胞培養(yǎng)，要求培養(yǎng)瓶松蓋，主要目的是讓氧氣進入培養(yǎng)瓶以供細胞代謝、使二氧化碳加入培養(yǎng)瓶維持培養(yǎng)液的PH．
故答案為：
（1）免疫活性       cDNA
（2）骨髓瘤細胞      有絲分裂
（3）融合的雜種     克隆化培養(yǎng)和抗體檢測（克隆化培養(yǎng)和專一抗體陽性檢測）
（4）分泌抗IL-4抗體     讓氧氣進入培養(yǎng)瓶以供細胞代謝、使二氧化碳加入培養(yǎng)瓶維持培養(yǎng)液的PH

點評 本題結合圖解，考查人體免疫系統(tǒng)在維持穩(wěn)態(tài)中的作用、單克隆抗體的制備，要求考生識記人體免疫系統(tǒng)的組成，掌握體液免疫和細胞免疫的具體過程；識記單克隆抗體的制備過程，能結合圖中和題中信息答題．