Question

【題目】如圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的過(guò)程圖解，請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）PstⅠ的識(shí)別序列為﹣G↓ACGTC﹣．如果用此酶切割DNA，則形成的能“粘連”起來(lái)兩段DNA片段為 ．
（2）構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時(shí)，需要酶和酶參與．將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時(shí)，可以用處理農(nóng)桿菌，使重組Ti質(zhì)粒易于導(dǎo)入．
（3）培養(yǎng)基中的青霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)．若利用該培養(yǎng)基篩選己導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使重組Ti質(zhì)粒中含有 ， 重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因，原因是 ．
（4）由導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因抗病香蕉，采用的是技術(shù)．將培育的轉(zhuǎn)基因抗病香蕉進(jìn)行無(wú)性繁殖，在產(chǎn)生的后代中檢測(cè)各單株的抗病性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有少數(shù)植株表現(xiàn)為不抗病，造成這一結(jié)果最可能的原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）
（2）PstI； EcoRI； CaCl2
（3）抗青霉素基因；它能鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因
（4）植物組織培養(yǎng)；抗病基因沒(méi)有表達(dá)
【解析】解：（1）PstⅠ的識(shí)別序列為﹣G↓ACGTC﹣，則其切割DNA后形成的能“粘連”起來(lái)兩段DNA片段為 ．（2）含有目的基因的外源DNA分子上有三種限制酶的識(shí)別序列，但SmaⅠ酶的識(shí)別序列位于目的基因上，用該酶切割會(huì)破壞目的基因，因此構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)該選用PstI 酶和EcoRI 酶．將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞常用感受態(tài)轉(zhuǎn)化法，即用CaCl2處理微生物細(xì)胞，使其成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細(xì)胞．（3）培養(yǎng)基中的青霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)．若利用該培養(yǎng)基篩選己導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使重組Ti質(zhì)粒中含有抗青霉素基因；重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因能鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，因此可作為標(biāo)記基因．（4）將轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)；將培育的轉(zhuǎn)基因抗病香蕉進(jìn)行無(wú)性繁殖，在產(chǎn)生的后代中檢測(cè)各單株的抗病性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有少數(shù)植株表現(xiàn)為不抗病，造成這一結(jié)果最可能的原因是抗病基因沒(méi)有表達(dá)．

所以答案是：（1）如圖 （2）PstI EcoRI CaCl2（3）抗青霉素基因 它能鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因（4）植物組織培養(yǎng) 抗病基因沒(méi)有表達(dá)

【考點(diǎn)精析】掌握基因工程的原理及技術(shù)是解答本題的根本，需要知道基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)．