Question

在生物技術(shù)實踐過程中，往往需要注意某些實驗步驟的操作，請將下列實驗中的注意事項填寫完整：
（1）在腐乳的制作時，用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用

 

消毒；在血紅蛋白的提取和分離中，若紅細胞的洗滌次數(shù)過少，將無法除去

 

．
（2）在提取植物細胞的DNA時，需要先用洗滌劑溶解

 

．在花藥離體培養(yǎng)中剝離花藥時，要徹底去除

 

，因為與其相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成．
（3）在“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)”課題中，往往需要稀釋土壤溶液，為了避免雜菌污染，此過程每一步都要在

 

旁操作．在固定化酵母細胞中加熱溶解海藻酸鈉時，最好采用

 

的方法．胡蘿卜素提取的萃取過程應(yīng)采用

 

加熱，因為有機溶劑都是易燃物．
（4）為避免外源DNA等因素的污染，PCR實驗中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液和蒸餾水等在使用前必須進行

 

．

Answer 1

考點：制作腐乳的科學原理及影響腐乳品質(zhì)的條件,以尿素為氮源，測定能生長的細菌的數(shù)量,DNA的粗提取和鑒定

專題：

分析：1、雜菌的污染會對培養(yǎng)結(jié)果造成影響，防止雜菌入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物是研究和應(yīng)用微生物的前提．實驗過程中，用沸水對玻璃瓶進行消毒，用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基進行滅菌．
2、蒸餾水對于雞血細胞來說是一種低滲液體，水分可以大量進入血細胞內(nèi)，使血細胞脹裂，再加上攪拌的機械作用，就加速了雞血細胞的破裂（細胞膜和核膜的破裂），從而釋放出DNA．

解答： 解：（1）腐乳的制作起主要作用的是毛霉，為了防止雜菌的污染，腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水消毒．血液中含量血漿、紅細胞的等成分，血漿中的血漿蛋白存在會影響后期血紅蛋白的提取，故應(yīng)多次洗滌，除去血漿蛋白等雜蛋白．
（2）在提取植物細胞的DNA時，需要先用洗滌劑溶解細胞膜，動物細胞則用蒸餾水脹破．在花藥離體培養(yǎng)中剝離花藥時，要盡量不損傷花藥，否則接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織，同時還要徹底去除花絲，因為與花絲相連的花藥，不利于愈傷組織或胚狀體的形成．
（3）稀釋土壤溶液的實驗操作中，為了避免周圍環(huán)境中微生物的污染，應(yīng)在火焰旁操作，因為酒精燈火焰一定范圍內(nèi)，由于溫度比較高所以沒有雜菌．在固定化酵母細胞中加熱溶解海藻酸鈉時，最好采用小火間斷加熱的方法．如果加熱太快，海藻酸鈉會發(fā)生焦糊．胡蘿卜素提取的萃取過程應(yīng)避免明火加熱，采用水浴加熱，因為有機溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸．
（4）PCR是進行DNA的擴增，為避免外源DNA等的污染，PCR實驗中使用的相關(guān)器具如微量離心管、槍頭、緩沖液和蒸餾水等應(yīng)提前高壓蒸汽滅菌．
故答案為：
（1）沸水 血漿蛋白
（2）細胞膜   花絲
（3）火焰  小火間斷加熱    水浴
（4）高壓滅菌

點評：本題考查腐乳的制作、土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)、DNA的粗提取、月季的花藥培養(yǎng)、多聚酶鏈式反應(yīng)擴增DNA片段、酵母細胞的固定化、血紅蛋白的提取和分離、胡蘿卜素的提取，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．