綠色熒光蛋白基因（GFP）被發(fā)現(xiàn)以來，一直作為一個監(jiān)測完整細胞和組織內(nèi)基因表達及蛋白位的理想標記。請根據(jù)圖表回答下列問題。
（1）若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是TCGA，N端伸出的核苷酸的堿基序列是TGCA，則在構建含該GFP的重組質(zhì)粒A時，應選用限制酶      ，再對          進行切割。
（2）若對符合設計要求的重組質(zhì)粒A進行酶切，假設所用的酶均可將識別位點完全切開，請根據(jù)圖表中的信息分析，若采用BamH1和Pst1酶切，可得到       種DNA片段。
（3）檢測GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的染色體DNA上，可在熒光顯微鏡下觀察GFP的表達，圖中綠色熒光蛋白轉基因克隆豬的轉基因操作中的GFP既是      也是           。
（4）綠色熒光蛋白轉基因克隆豬的培育過程中涉及到多項現(xiàn)代生物技術，圖中⑤⑥⑦過程屬于           技術，而⑨過程屬于              技術。

練習冊系列答案
相關習題

科目：高中生物 來源： 題型：

我國科學家發(fā)現(xiàn)，彎曲的蠶絲由于彎折處容易斷裂，其強度低于由蜘蛛紡績器拖牽絲的直絲，并首次在世界上通過轉基因方法將“綠色熒光蛋白基因”和“蜘蛛拖牽絲基因”拼接成功插入蠶絲基因組中，并在受體細胞中得到成功表達。

（1）這項基因工程的操作中，目的基因是              ，綠色熒光蛋白基因的主要目的是                                。

（2）在基因工程中，若選出的目的基因共1000個脫氧核苷酸對，其中腺嘌呤脫氧核苷酸有460個，放入DNA擴增儀中擴增4代，那么，在擴增儀中放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個數(shù)至少應是              個。

（3）若限制性內(nèi)切酶A的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制性內(nèi)切酶B的識別序列和切點是—↓GATC—。則限制性內(nèi)切酶A切割質(zhì)粒形成的黏性末端是         ，若在DNA連接酶的作用下，上述兩種限制性內(nèi)切酶切割后形成的黏性末端是否能夠連接             。

（4）下列關于生物工程中酶的作用的敘述中，錯誤的是（    ）

A．纖維素酶可用于植物體細胞雜交

B．胰蛋白酶可用于動物細胞培養(yǎng)

C．限制性內(nèi)切酶只能用于提取目的基因

D．DNA連接酶只能用于DNA的拼接重組

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科目：高中生物 來源：2011-2012學年廣東省連州市連州中學高二下學期期中考試生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻，獲得2008年度諾貝爾化學獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉基因克隆豬的培育過程示意圖。據(jù)圖回答：

(1)圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性核酸內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性核酸內(nèi)切酶I的識別序列和切點是—G↓GATCC—，請畫出質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：____________________________________­­______________。
(2)過程③將重組質(zhì)粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多也最有效的方法是________________________________。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上，GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因，其作用是______________________________。
(4)目前科學家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是(用數(shù)字表示)________________________。
①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列
③藍色熒光蛋白基因的修飾(合成)
④表達出藍色熒光蛋白
（5）若要在體外擴增綠色熒光蛋白基因可采用PCR技術。標準的PCR過程分為三個步驟，第一步是“變性”,這一步驟如果發(fā)生在細胞內(nèi)，是在                    的作用下完成的；第二步是退火；第三步是“延伸”，需要用到                      酶。
(6)以上培育過程中應用到的生物技術有_________________________________________等。(至少答出三項)   

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科目：高中生物 來源：2011屆上海市嘉定區(qū)高三上學期第一次質(zhì)量調(diào)研生物試卷 題型：綜合題

分析回答有關生物工程中的問題：（8分）
日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白（GFP）等方面的突出貢獻，獲得2008年度諾貝爾化學獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉基因克隆豬的培育過程示意圖．據(jù)圖回答：

（1）綠色熒光蛋白基因在該實驗中是做為________基因。圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性內(nèi)切酶I的識別序列和切點是—G’GATCC—，請畫出質(zhì)粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的過程：________________________                                 
 _________。
（2）過程③將重組質(zhì)粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多也最有效的方法是_______________                              ___。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上，GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因，其作用是_______________________。
(4)目前科學家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是（用數(shù)字表示）：_______              ___                           。
①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計③藍色熒光蛋白基因的修飾（合成）④表達出藍色熒光蛋白。
(5)在培養(yǎng)重組細胞時，培養(yǎng)液中通常含有_____________、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。
(6)以上培育過程中應用到的生物技術有_________________________________等（至少答出三項）。

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科目：高中生物 來源：2013屆廣東省連州市高二下學期期中考試生物試卷（解析版） 題型：綜合題

日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻，獲得2008年度諾貝爾化學獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉基因克隆豬的培育過程示意圖。據(jù)圖回答：

 (1)圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性核酸內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性核酸內(nèi)切酶I的識別序列和切點是—G↓GATCC—，請畫出質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：____________________________________­­______________。

(2)過程③將重組質(zhì)粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多也最有效的方法是________________________________。

(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上，GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因，其作用是______________________________。

(4)目前科學家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是(用數(shù)字表示)________________________。

①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列

③藍色熒光蛋白基因的修飾(合成)

④表達出藍色熒光蛋白

（5）若要在體外擴增綠色熒光蛋白基因可采用PCR技術。標準的PCR過程分為三個步驟，第一步是“變性”,這一步驟如果發(fā)生在細胞內(nèi)，是在                     的作用下完成的；第二步是退火；第三步是“延伸”，需要用到                       酶。

 (6)以上培育過程中應用到的生物技術有_________________________________________等。(至少答出三項)   

 

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科目：高中生物 來源：2010-2011學年上海市嘉定區(qū)高三上學期第一次質(zhì)量調(diào)研生物試卷 題型：綜合題

分析回答有關生物工程中的問題：（8分）

日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白（GFP）等方面的突出貢獻，獲得2008年度諾貝爾化學獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉基因克隆豬的培育過程示意圖．據(jù)圖回答：

（1）綠色熒光蛋白基因在該實驗中是做為________基因。圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性內(nèi)切酶I的識別序列和切點是—G’GATCC—，請畫出質(zhì)粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的過程：________________________                                 

 _________。

（2）過程③將重組質(zhì)粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多也最有效的方法是_______________                              ___。

(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上，GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因，其作用是_______________________。

(4)目前科學家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是（用數(shù)字表示）：_______              ___                            。

①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計③藍色熒光蛋白基因的修飾（合成）④表達出藍色熒光蛋白。

(5)在培養(yǎng)重組細胞時，培養(yǎng)液中通常含有_____________、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。

(6)以上培育過程中應用到的生物技術有_________________________________等（至少答出三項）。

 

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