Question

【題目】在遺傳病監(jiān)測及刑偵破案中常需要對樣品DNA進行分析，PCR技術能快速擴增DNA片段，在幾個小時內復制上百萬份的DNA拷貝，有效地解決了因為樣品中DNA含量太低而難以對樣品進行分析研究的問題。據(jù)圖回答相關問題：

(1) 在PCR中先用95 ℃高溫處理的目的是________；而這一過程中在細胞內DNA復制時是通過________實現(xiàn)的。

(2) 在PCR技術中所需要的引物實質上是一種________，在相應的橫線上寫出引物Ⅱ________�！�

(3) 在相應的橫線上寫出循環(huán)一次后生成的DNA：________(寫出①、②中的一種即可)。

(4) 若將1個DNA分子拷貝10次，則需要在緩沖液中至少加入________個引物。

(5) 在對樣品DNA進行分析的過程中發(fā)現(xiàn)，DNA摻雜著一些組蛋白，要去除這些組蛋白可加入的物質是________。

Answer 1

【答案】 使DNA變性(使DNA的兩條鏈解開) 解旋酶的催化 (一小段)單鏈DNA或RNA分子 5′—G—A—OH(或HO—A—G—5′) 或 211－2(或答2046) 蛋白酶

【解析】本題考查基因工程中的PCR技術，解題要點是對PCR技術的原理、步驟的識記。

（1）在PCR技術中，用95 ℃高溫處理的目的是使DNA分子中的氫鍵斷裂，兩條鏈解開，即使DNA分子變性。這一過程在細胞內DNA復制時是通過解旋酶的催化實現(xiàn)的。

（2）引物實質上是一段單鏈DNA或RNA分子，它能與解開的DNA母鏈的3′端結合，為DNA聚合酶提供吸附位點。引物Ⅱ的序列是：5′—G—A—OH。

（3）根據(jù)（2）的分析，循環(huán)一次后生成的DNA是：或

（4）在DNA分子擴增時，需要2種引物，由于新合成的子鏈都需要引物作為復制的起點，故所需的引物數(shù)目等于新合成的DNA子鏈數(shù)目，即2×210－2個。

（5）蛋白酶能催化蛋白質分解，故除去DNA中摻雜的組蛋白可加入蛋白酶。

[點睛]：PCR技術易錯的知識點：關于引物的設計：引物長度約17個堿基；兩個引物之間不應發(fā)生互補；引物與DNA模板鏈結合如圖所示：