【題目】正常細(xì)胞中含有抑癌的 P53 基因,能表達(dá)抗病毒蛋白,幫助修復(fù)輕度變異的基因,也能使重復(fù)變異的細(xì)胞發(fā)生凋亡而避免腫瘤的發(fā)生;若它失活而不能表達(dá),則基因突變的細(xì)胞易形成腫瘤。基因治療腫瘤是根本的方法,腺病毒以其嗜好增殖細(xì)胞和對人體基本無害而成為良好的基因載體。野生型腺病毒含有抑制 P53 基因活性的 55Kda 基因,以及病毒復(fù)制基因 E1,因此需要重新構(gòu)建有療效的、安全的腺病毒。圖甲、乙中箭頭所指為相應(yīng)限制酶切點(diǎn)。

(1)DNA 解旋酶直接作用于脫氧核苷酸之間的_____鍵(化學(xué)鍵);限制酶直接作用于脫氧核苷酸之間的_____鍵(化學(xué)鍵)。

(2)構(gòu)建重組腺病毒時,限制酶最好選擇____,理由是:既可以去除_____基因以防止病毒復(fù)制后損傷健康細(xì)胞,同時還能破壞_____基因以防止其_____。

(3)在基因工程操作中,檢測目的基因是否發(fā)揮功能的第一步是_____,檢測方法是____技術(shù),若出現(xiàn)雜交帶,則表明成功。

(4)如果需將目的基因利用 PCR 技術(shù)擴(kuò)增 10 次,則需要在緩沖液中至少加入____個引物。A210B210+2 C211D211-2

(5)PCR 擴(kuò)增目的基因的前提是_____,以便根據(jù)這一序列合成引物。PCR 需提供_____, 引物,dNTPDNA 模板。反應(yīng)結(jié)束后,可以利用 DNA _____特點(diǎn)進(jìn)行 DNA 含量的測定。

【答案】 磷酸二酯鍵 BamHI EcoRI E1 55kda 抑制 P53 基因的活性 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出 mRNA 分子雜交 D 有一段已知目的基因的核苷酸序列 Taq DNA 260nm 的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰

【解析】

分析題圖:圖甲為野生型腺病毒DNA,其中含有抑制P53基因活性的55Kda基因,以及病毒復(fù)制基因E1,因此構(gòu)建基因表達(dá)載體時應(yīng)破壞或去除55Kda基因和基因E1

圖乙為人體DNA片段,其中P53基因?yàn)槟康幕颍@得目的基因(P53基因),同時還要破壞或去除55Kda基因和基因E1,應(yīng)選用EcoRIBamHI切割載體和含有目的基因的DNA。

1DNA 解旋酶直接作用于脫氧核苷酸之間的氫鍵,使DNA的雙鏈解開螺旋;限制酶直接作用于脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

2)根據(jù)題干信息“野生型腺病毒含有抑制P53基因活性的55Kda基因,以及病毒復(fù)制基因E1”可知,構(gòu)建基因表達(dá)載體時,應(yīng)選用EcoRIBamHI切割載體和含有目的基因的DNA,這樣既可以去除E1基因以防止病毒復(fù)制后損傷健康細(xì)胞,同時還能破壞55Kda基因以防止其抑制P53基因的活性。

3)在基因工程操作中,檢測目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,檢測方法是分子雜交技術(shù),用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交,若出現(xiàn)雜交帶,則表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了mRNA。

4)利用PCR技術(shù)將目的基因擴(kuò)增N次,至少需要的引物2N+1-2個,如果需將目的基因利用 PCR 技術(shù)擴(kuò)增 10 次,則需要在緩沖液中至少加入211-2個引物,故選D。

5PCR 擴(kuò)增目的基因的前提是有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物。PCR 需提供Taq 酶,引物,dNTP,DNA模板。反應(yīng)結(jié)束后,可以利用 DNA DNA 260nm 的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰特點(diǎn)進(jìn)行 DNA 含量的測定。

練習(xí)冊系列答案
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【題目】圖甲表示溫度對淀粉酶活性的影響;圖乙是將一定量的淀粉酶和足量的淀粉混合后,麥芽糖積累量隨溫度(時間)變化的情況,下列說法中不正確的是( 。

A.T0表示淀粉酶催化反應(yīng)的最適溫度

B.圖甲中,Ta、Tb時淀粉酶催化效率都很低,但對酶活性的影響有本質(zhì)的區(qū)別

C.圖乙中TbTc的曲線表明隨溫度的升高,麥芽糖不再上升,酶的活性己達(dá)到最大

D.圖乙中A點(diǎn)對應(yīng)的溫度為T0左右

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【題目】從基因型為Aa的綠色植物某器官中獲取組織,顯微觀察如下圖。下列對該圖所示細(xì)胞的敘述正確的是(  )。

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B.若將Y細(xì)胞離體培養(yǎng)成幼苗后用秋水仙素處理,目的是使其發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)變異

C.XY兩個細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交,形成雜種細(xì)胞,發(fā)育成的雜種植株往往是不可育的

D.如果XY細(xì)胞所含蛋白質(zhì)種類有明顯差異,其根本原因是信使RNA的不同

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【題目】下圖為某興趣小組開展“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)過程中的一些操作示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是

A. 正確的操作順序是C→B→E→D→A

B. 步驟A中加入酒精是為了提高DNA的溶解度

C. 步驟C中加入蒸餾水的主要目的是讓DNA不溶于水而析出

D. 步驟E中加入蒸餾水的量與DNA析出的量成正相關(guān)

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【題目】如圖為某生物工程操作流程模式圖,下列說法正確的是(

A.如果此圖表示植物細(xì)胞融合的過程,用纖維素酶處理植物體細(xì)胞后得到A、B細(xì)胞方可進(jìn)行細(xì)胞融合操作,得到的C就是所需的重組細(xì)胞

B.如果此圖表示動物細(xì)胞融合過程,則可以直接使用仙臺病毒對AB進(jìn)行促融,得到重組細(xì)胞C

C.若此圖為克隆羊多利的培育過程,則用到了細(xì)胞核移植、動物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎分割和胚胎移植等生物技術(shù)

D.若此圖為抗蟲棉的培育過程,則獲得成功導(dǎo)入C(重組DNA)的受體細(xì)胞D需經(jīng)植物組織培養(yǎng)后才能長成我們所需要的植株

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【題目】如圖表示DNA分子的部分結(jié)構(gòu)示意圖,下列說法正確的是(

A.DNARNA之間的區(qū)別就是⑤的不同

B.DNA的基本組成單位可用圖中字母a表示

C.DNA的基本單位之間依靠③連接

D.利用DNA指紋法偵破案件利用的是④的排列順序的特異性

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【題目】玉米根尖縱切片經(jīng)堿性染料染色,用普通光學(xué)顯微鏡觀察到的分生區(qū)圖像如下。對此圖像的觀察與分析,錯誤的是

A. 先用低倍鏡再換高倍鏡觀察符合操作規(guī)范

B. 可觀察到箭頭所指細(xì)胞的細(xì)胞核和細(xì)胞壁

C. 在圖像中可觀察到處于分裂期前期的細(xì)胞

D. 細(xì)胞不同結(jié)構(gòu)成分與該染料結(jié)合能力不同

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【題目】下圖為某單基因遺傳病的家族系譜圖,已知Ⅰ-2 為攜帶者。下列說法正確的是(

A.該病為X染色體隱性遺傳病

B.-3一定為雜合子

C.-4一定含有致病基因

D.-3是雜合子的概率為2/3

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【題目】兔的毛色黑色(W)與白色(w)是一對相對性狀,與性別無關(guān)。如圖所示兩項(xiàng)交配中,親代兔EFP、Q均為純合子,子代兔在不同環(huán)境下成長,其毛色如圖所示,下列分析錯誤的是

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C.G與兔R交配得到子代,若子代在-15 ℃環(huán)境下成長,最可能的表現(xiàn)型及其比例黑色∶白色=11

D.由圖可知,表現(xiàn)型是基因和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果

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