Question

【題目】某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實驗材料純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣�；卮鹣铝袉栴}：

（1）分離純化乳酸菌時，首先需要用_________________對泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是_________________。

（2）推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有_________________和_________________。分離純化時應(yīng)挑選出_________________的菌落作為候選菌。

（3）乳酸菌在-20℃長期保存時，菌液中常需要加入一定量的_________________（填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”）。

Answer 1

【答案】（1）無菌水 泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落

（2）鑒別乳酸菌 中和產(chǎn)生的乳酸 具有透明圈

（3）甘油

【解析】（1）分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋；進(jìn)行梯度稀釋的理由是在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。若直接培養(yǎng)，由于泡菜濾液中菌的濃度高，則很難分離得到單菌落。

（2）由題意可知，分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。由此可推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸和鑒別能產(chǎn)生乳酸的乳酸菌；根據(jù)產(chǎn)酸菌在含CaCO3的培養(yǎng)基上產(chǎn)生透明的原理，分離純化時應(yīng)挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌，然后用平板劃線法進(jìn)一步分離純化。

（3）對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。即將1mL培養(yǎng)的菌種轉(zhuǎn)移到已滅菌的盛有1mL甘油的甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱中保存。所以乳酸菌在-20℃長期保存時，菌液中常需要加入一定量的甘油。