Question

19．制備培養(yǎng)基方法：將蛋白胨、NaCl和牛肉膏放入燒杯內，加200mL蒸餾水，用玻璃棒攪勻后，在酒精燈上加熱．當蛋白胨、牛肉膏融化后，加入瓊脂，用微火繼續(xù)加熱至瓊脂溶化，補充水至200mL．用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl將pH調至7.0～7.2，分別對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行高壓蒸汽滅菌．當培養(yǎng)基的溫度下降到50℃時，將其分裝在5套培養(yǎng)皿中，當培養(yǎng)基冷卻至室溫，按下表分別進行處理．將處理完畢的培養(yǎng)基置于35℃的溫度下培養(yǎng)2～3天，觀察每個培養(yǎng)基中的細菌生長情況．請回答下列問題：

第1套	開蓋，在空氣中暴露10s
第2套	用手指接觸培養(yǎng)基約10s
第3套	用硬幣接觸培養(yǎng)基約10s
第4套	用濾紙擦一下課桌，再接觸培養(yǎng)基約10s
第5套	對照（不打開蓋）

（1）該培養(yǎng)基中，蛋白胨提供的主要營養(yǎng)是氮源和維生素，此外，培養(yǎng)基中還必須含有的營養(yǎng)物質有水、無機鹽和碳源．該培養(yǎng)基因其中加入了瓊脂而被稱為固體培養(yǎng)基，另外因含有牛肉膏、蛋白胨等成分而被稱為天然培養(yǎng)基．
（2）除上述滅菌方法外，還可用干熱滅菌和灼燒滅菌方法滅菌，其中后者主要適用于金屬工具．以上方法能夠殺死物體內外的所有的微生物，與之相比，消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體內外的部分微生物．
（3）在實驗操作中，“當培養(yǎng)基的溫度下降到50℃時，將其分裝在5套培養(yǎng)皿中”的過程稱為倒平板，“當培養(yǎng)基冷卻至室溫”后應該將平板倒置．試驗中有三處特別強調溫度控制，請簡要說明其控制溫度的科學道理：
①“高壓蒸汽滅菌后培養(yǎng)基的溫度下降到50℃”是防止培養(yǎng)基的溫度過高使培養(yǎng)皿因受熱不均而破裂．
②“當培養(yǎng)基冷卻至室溫，按下表分別進行處理”防止培養(yǎng)基溫度過高殺死接種在其上的微生物．
③“將處理完畢的培養(yǎng)基置于35℃的溫度下培養(yǎng)”為細菌生長繁殖提供適宜的溫度．

Answer 1

分析 微生物的營養(yǎng)物質主要有碳源、氮源、水和無機鹽等，有些微生物還需要特殊的營養(yǎng)物質．微生物的培養(yǎng)還需要適宜的溫度、pH及是否需要氧氣等條件．培養(yǎng)基按其所含成分，可分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基三類．培養(yǎng)基按其物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基三類．培養(yǎng)基按微生物的種類可分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基和霉菌培養(yǎng)基等四類．培養(yǎng)基按其特殊用途可分為加富培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．

解答 解：（1）根據題意該培養(yǎng)基為牛肉膏-蛋白胨培養(yǎng)基，其中蛋白胨可以為微生物提供氮源和維生素．培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質主要有碳源、氮源、生長因子、水分、無機鹽等．其中加入瓊脂而凝固后被稱為固體培養(yǎng)基，因含有牛肉膏、蛋白胨等成分而被稱為天然培養(yǎng)基．
（2）滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內外一切微生物的細胞、芽孢和孢子的過程，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌．消毒是指用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體體表或內部的一部分微生物的過程．
（3）題干中的操作稱為倒平板，培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基冷凝后有關將平板倒置．
②當培養(yǎng)基冷卻至室溫，進行表中的操作是為了防止培養(yǎng)基溫度過高殺死接種在其上的細菌（或微生物）．
③培養(yǎng)基皿于35℃的溫度下培養(yǎng)是讓細菌在適宜的溫度下快速生長繁殖．
故答案為：
（1）氮源和維生素    碳源     固體培養(yǎng)基    天然培養(yǎng)基
（2）干熱滅菌    灼燒滅菌    所有的微生物    較為溫和的物理或化學   部分微生物
（3）倒平板    將平板倒置
②防止培養(yǎng)基溫度過高殺死接種在其上的細菌（或微生物）
③讓細菌在適宜的溫度下快速生長繁殖

點評 本題主要考查微生物的營養(yǎng)物質和培養(yǎng)調節(jié)的控制，意在強化學生對相關知識的理解與掌握．