Question

【題目】酒曲中含有大量的微生物，其中有霉菌、酵母菌和細(xì)菌等。某研究小組嘗試使用蔗糖豆芽汁培養(yǎng)基從酒曲中分離酵母菌。請回答下列問題：

（1）培養(yǎng)基是分離酵母菌的關(guān)鍵。配置培養(yǎng)基時，先將200.0g豆芽洗凈，放入水中煮沸30min，用紗布過濾，取豆芽汁加30.0g蔗糖，并補(bǔ)水分至1000mL。酵母菌在該培養(yǎng)基中生長較霉菌_________。研究小組分析認(rèn)為還應(yīng)在培養(yǎng)基中添加0.5%乳酸，研究小組的依據(jù)是__________。

（2）用滅菌的小刀切開曲塊，從內(nèi)部取一小塊加入一管培養(yǎng)基中，搖動后將該管置于__________℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，兩天后適量轉(zhuǎn)移到另一管培養(yǎng)基中。轉(zhuǎn)移培養(yǎng)3～4次。

（3）可采用___________________方法分離純化培養(yǎng)基中的酵母菌。使用該方法所用的培養(yǎng)基需重新配置，且必須在培養(yǎng)基中添加適量的______________。

（4）研究小組查閱資料發(fā)現(xiàn)，酵母菌發(fā)酵時，當(dāng)酒精含量達(dá)到12～16%時，發(fā)酵就停止了，其原因是_________________。研究小組進(jìn)一步進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)以確定所分離的其中1株酵母菌對酒精的最高耐受濃度，其實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路是________。

Answer 1

【答案】 快 酸性條件下酵母菌可以生長繁殖，細(xì)菌則受到抑制 18～25 稀釋涂布平板法（或平板劃線法） 瓊脂 酒精對細(xì)胞有毒害作用 配置含有一系列酒精濃度梯度（包含12～16%）的培養(yǎng)基，分別接種所分離的酵母菌，在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間后，觀察記錄培養(yǎng)基中菌落的生長情況，超過最高耐受濃度后，酵母菌不能生長。

（或：使用分離的酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，每隔一段時間，測定發(fā)酵液的酒精濃度，當(dāng)酒精濃度不再增加時，即可確定所分離的酵母菌對酒精的最高耐受濃度。）

【解析】【試題分析】

本題考查使用蔗糖豆芽汁培養(yǎng)基從酒曲中分離酵母菌的相關(guān)知識。酒曲中含有大量的微生物，其中有霉菌、酵母菌和細(xì)菌等，蔗糖豆芽汁培養(yǎng)基可以用來培養(yǎng)酵母菌和霉菌，使它們與細(xì)菌分離開來。酵母菌多數(shù)為腐生，一般生長在含糖較高，偏酸的環(huán)境中，在通氣條件下，液體培養(yǎng)比霉菌快。對初步分離出的酵母菌進(jìn)行稀釋、涂布、多次劃線而使各種菌體得以分開，形成單菌落。據(jù)此答題。

（1）蔗糖豆芽汁培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，在通氣條件下，液體培養(yǎng)中的酵母菌比霉菌生長快；酸性條件下酵母菌可以生長繁殖，細(xì)菌則受到抑制，因此可在培養(yǎng)基中添加0.5%乳酸，以造成酸性環(huán)境。

（2）培養(yǎng)酵母菌是適宜溫度是18～25℃。

（3）可采用稀釋涂布平板法（或平板劃線法）分離純化培養(yǎng)基中的酵母菌；采用該方法所用的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，所以必須重新配置培養(yǎng)基，且在培養(yǎng)基中添加適量的瓊脂做凝固劑。

（4）酒精對細(xì)胞有毒害作用，所以酵母菌發(fā)酵時，當(dāng)酒精含量達(dá)到12～16%時，發(fā)酵就會停止；要進(jìn)一步確定所分離的其中1株酵母菌對酒精的最高耐受濃度，可配置含有一系列酒精濃度梯度（包含12～16%）的培養(yǎng)基，分別接種所分離的酵母菌，在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間后，觀察記錄培養(yǎng)基中菌落的生長情況，超過最高耐受濃度后，酵母菌不能生長。