Question

2．絮凝性細菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能與石油污水中的懸浮顆粒和有機物等形成絮狀沉淀，起到凈化污水的作用．為進一步提高對石油污水的凈化效果，將絮凝性細菌和石油降解菌融合，構建目的菌株．其流程圖如圖．請據(jù)圖回答：

（1）溶菌酶的作用是去除分解細胞壁以獲得具有活力的原生質體，其原理是利用了酶的專一性性．PEG的作用是誘導原生質體融合．
（2）制備的培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，在篩選培養(yǎng)之前，所使用的培養(yǎng)基除了作為營養(yǎng)基質外，還有調節(jié)滲透壓的作用；
（3）在再生培養(yǎng)基上，只有AB融合菌能生長和繁殖，其原因是兩親本失活的部位不同，融合后活性部位進行了互補；
（4）目的菌株的篩選：篩選既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有石油的培養(yǎng)基上生長的AB融合菌，選擇效果最好（“效果最好”、“效果中等”或“效果最差”）的為目的菌株．

Answer 1

分析 本題主要考查細胞融合的知識．
1、植物細胞融合的方法：物理法（離心、振動、電刺激等） 和化學法 （聚乙二醇（PEG） ）．
2、動物細胞融合的方法：物理法、化學法（同植物）以及生物法（滅活病毒等）．
3、細胞融合的原理是細胞膜的流動性．

解答 解：（1）細菌有細胞壁，這將妨礙細菌的融合，所以用溶菌酶將其細胞壁進行分解，以實現(xiàn)兩者的融合．去除細胞壁的細菌細胞是具有活力的原生質體．利用了溶菌酶的專一性．PEG是促進細胞融合的促融劑，作用是促進細胞融合．
（2）微生物的培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，在篩選培養(yǎng)之前，所使用的培養(yǎng)基除了作為營養(yǎng)基質外，還有調節(jié)滲透壓的作用．
（3）由圖示顯示A菌細胞質失去活性，B菌DNA失去活性，所以融合后，在選擇培養(yǎng)基上單純的A、B菌都不能存活，而融合的AB菌的活性部位進行了互補，能進行生長并繁殖．
（4）目的菌的選擇是要選擇能分泌具有絮凝活性的活性高分子化合物，又具有降解石油的能力的融合菌．在培養(yǎng)基上生長的AB融合菌，選擇效果最好的為目的菌株．
故答案為：
（1）分解細胞壁    原生質體     專一性    誘導原生質體融合
（2）高壓蒸汽滅菌    滲透壓
（3）活性部位
（4）具有絮凝活性的化合物   石油   效果最好

點評 本題主要考查學生對知識的理解和分析能力．要注意，目前應用最廣泛的是聚乙二醇（PEG），因為它易得、簡便，且融合效果穩(wěn)定．PEG的促融機制尚不完全清楚，它可能引起細胞膜中磷脂的酰鍵及極性基團發(fā)生結構重排．