Question

【題目】有機(jī)化合物M是某河流水中主要的工業(yè)污染物，某興趣小組欲從污水處理廠的污泥中分離獲得能夠分解有機(jī)化合物M的細(xì)菌。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：

（1）為了篩選污泥中可分解有機(jī)化合物M的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基考慮碳源時(shí)應(yīng)該____，該培養(yǎng)基在接種前應(yīng)該用____法滅菌。

（2）常用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物接種并計(jì)數(shù)，若當(dāng)稀釋倍數(shù)為105時(shí)平板上的平均菌落數(shù)為50個(gè)，所用稀釋液的體積為0.2mL，則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)約為____個(gè)。運(yùn)用該方法計(jì)數(shù)的結(jié)果往往比樣品中實(shí)際數(shù)目低，原因是____。

（3）該興趣小組在污泥中分離獲得了酵母菌，如果利用其進(jìn)行酒精發(fā)酵，會(huì)產(chǎn)生氣泡且發(fā)酵液pH下降，請(qǐng)分析出現(xiàn)該現(xiàn)象的原因是：____。

（4）在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是____，其目的是____。

Answer 1

【答案】以有機(jī)化合物M為唯一碳源 高壓蒸汽滅菌 2.5 X 107 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 氣泡的產(chǎn)生是由于酵母菌通過(guò)無(wú)氧呼吸，將糖類等有機(jī)物轉(zhuǎn)化為酒精，同時(shí)釋放出二氧化碳；在酒精發(fā)酵過(guò)程中，產(chǎn)生的二氧化碳、多種酸性物質(zhì)都會(huì)使pH 下降 無(wú)菌操作（防止外來(lái)雜菌污染） 防止培養(yǎng)物被雜菌污染、防止污染環(huán)境、避免感染操作者

【解析】

為了篩選可分解有機(jī)化合物M的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基應(yīng)該以有機(jī)化合物M作為唯一碳源。

2、培養(yǎng)基滅菌一般都采用高壓蒸汽滅菌法。

3、為了培養(yǎng)微生物進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，常常采用稀釋涂布平板法，這種方法計(jì)數(shù)的結(jié)果往往比樣品中實(shí)際數(shù)目低，主要原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。

4、在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌污染，目的是防止培養(yǎng)物被雜菌污染、防止污染環(huán)境、避免感染操作者。

（1）為了篩選污泥中可分解有機(jī)化合物M的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)該以有機(jī)化合物M作為唯一碳源。培養(yǎng)基滅菌一般都采用高壓蒸汽滅菌法。

（2）常用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物接種并計(jì)數(shù)，若當(dāng)稀釋倍數(shù)為105時(shí)平板上的平均菌落數(shù)為50個(gè)，所用稀釋液的體積為0.2mL，則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)約為50÷0.2×105=2.5×107個(gè)。用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果往往比樣品中實(shí)際數(shù)目低，主要原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。

（3）利用酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵時(shí)，其無(wú)氧呼吸會(huì)產(chǎn)生CO2的氣泡，同時(shí)CO2溶解在發(fā)酵液中以及多種酸性物質(zhì)的產(chǎn)生等都會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵液pH下降。

（4）在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌污染，這里的防污不僅僅是防止培養(yǎng)物被雜菌污染、更要注意防止對(duì)環(huán)境的污染和對(duì)操作者的感染。