Question

【題目】[生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題]

下圖1所示為用PvuⅠ限制酶切下的某目的基因及其上DNA片段示意圖；圖2所示為三種質粒示意圖。圖中AP為氨芐青霉素抗性基因，Tc為四環(huán)素抗性基因。EcoRⅠ、PvuⅠ等為限制酶及其切割的位點與復制原點的距離。復制原點是在基因組上復制起始的一段序列，是指質粒在受體細胞中復制時的起點。

（1）組成片段D的基本骨架與細胞膜的基本骨架相同的元素是___________。

（2）圖2中質粒A、質粒C能否作為目的基因運載體最理想的質粒？_________ (填“能”或“否”），請說明理由________________。

（3）重組質粒成功導入受體細胞的概率一般僅在10-7，用質粒B構建重組質粒，為了篩選出導入了重組質粒的大腸桿菌，在導入完成后，將所有大腸桿菌分別在含有四環(huán)素和氨芐青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，大腸桿菌在兩種培養(yǎng)基的生長狀況不可能的是____________，可能性最大的是_____________。

（4）若想在山羊的乳汁中收獲上述目的基因的表達產(chǎn)物，則需要將重組質粒導入至山羊的_________（細胞）中。

Answer 1

【答案】 C、H、O、P 否 質粒A缺少標記基因；質粒C在用和目的基因相同的限制酶切割時，復制原點會被限制酶切割，會影響重組質粒的自主復制 在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能正常生長,在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能正常生長 在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基和含四環(huán)素的培養(yǎng)基上都不能正常生長 受精卵

【解析】試題分析：熟記并理解基因工程的基本操作程序等相關的基礎知識、形成清晰的知識網(wǎng)絡。在此基礎上，從題意和題圖中提取有效信息并圍繞質粒載體必備的基本條件、基因工程的基本操作程序等知識，進行相關問題的解答。

(1)脫氧核糖和磷酸交替連接構成DNA片段D的基本骨架，脫氧核糖由C、H、O三種元素組成，組成磷酸的元素是H、P、O；磷脂雙分子層構成細胞膜的基本骨架，磷脂分子是由C、H、O、N、P組成；可見，組成片段D的基本骨架與細胞膜的基本骨架相同的元素是C、H、O、P。

(2)分析圖2可知：質粒A缺少標記基因，質粒C在用和目的基因相同的限制酶切割時，復制原點會被限制酶切割，進而影響重組質粒的自主復制，所以質粒A、質粒C均不能作為目的基因運載體最理想的質粒。

(3)用質粒B構建重組質粒，當用和目的基因相同的限制酶（PvuⅠ）切割時，Tc（四環(huán)素抗性基因）遭到破壞，而AP（氨芐青霉素抗性基因）結構完好，因此在重組質粒導入完成后，將所有大腸桿菌分別在含有四環(huán)素和氨芐青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，大腸桿菌在兩種培養(yǎng)基的生長狀況不可能的是在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能正常生長,在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能正常生長。因重組質粒成功導入受體細胞的概率一般僅在10-7，所以可能性最大的是在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基和含四環(huán)素的培養(yǎng)基上都不能正常生長。

(4)若想在山羊的乳汁中收獲上述目的基因的表達產(chǎn)物，則需要將重組質粒導入至山羊的受精卵中。