Question

35.（7分）棉鈴蟲是一種危害棉花的害蟲。我國科學工作者發(fā)現(xiàn)一種生活在棉鈴蟲消化道內(nèi)的蘇云金桿菌能分泌一種毒蛋白使棉鈴蟲致死，而這種毒蛋白對人畜無害。通過基因工程方法，科學家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉(zhuǎn)入棉花植株并成功表達，棉鈴蟲吃了這種轉(zhuǎn)基因棉花的植株后就會死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌發(fā)時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進而導入尚不具備細胞壁的合子或早期胚細胞，最終形成含有目的基因的種胚。此種方法的優(yōu)點是操作簡便，省去了組培的復雜過程。

（1）利用花粉管通道法將毒蛋白基因?qū)�入棉花細胞，此過程是基因操作的基本步驟中的第三步，即                  。構(gòu)建基因表達載體時要把目的基因整合到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，其原因是                    。

（2）基因工程的工具酶可以將目的基因切下并連接到運載體上。限制酶可以識別特定的DNA序列，并切斷         鍵。下列所示的黏性末端是由         種限制酶作用產(chǎn)生的。

（3）用標記的特異性抗體可以直接檢測毒蛋白，這種檢測方法稱為                 。

也可在宏觀性狀水平檢測該目的基因是否表達，方法是                  。已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風險相對較小，原因是人類腸上皮細胞                 。

Answer 1

【答案】

35.（7分）

（1）將重組DNA導入受體細胞  Ti質(zhì)粒能將目的基因整合到棉花染色體上   

（2）磷酸二酯鍵    4

（3）抗原-抗體雜交     讓害蟲吃棉花，觀察害蟲的生存狀態(tài)      表面無特異性受體

【解析】利用花粉管通道法將毒蛋白基因?qū)�入棉花細胞，相當于基因工程操作步驟中的第三步——“將目的基因?qū)�入受體細胞”。據(jù)圖分析限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列為GAATT 、CAATT、GTTAA、CTTAA這4種，而酶具有專一性，故需4種不同的限制性核酸內(nèi)切酶。目的基因的檢測與鑒定相關(guān)方法為：通過分子雜交技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA是否插入了目的基因及目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA。