Question

2．生物技術(shù)與我們的生活息息相關(guān)．請回答下列問題：
（1）PCR技術(shù)能把某DNA分子片斷進行擴增，依據(jù)的原理是DNA復制；每次循環(huán)需要經(jīng)過變性、復性、延伸三步．
（2）在果醋制作時，運用醋酸菌在供應(yīng)氧氣和糖源充足時，將糖分解成醋酸；在糖源不充足時，也可以利用酒精生成醋酸．請寫出酒精生成醋酸的化學反應(yīng)式：C₂H₅OH+O₂→CH₃COOH+H₂O．
（3）制作泡菜時蔬菜在腌制過程中，會產(chǎn)生亞硝酸鹽．在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色溶液．
（4）進行月季花藥離體培養(yǎng)，一般選擇在五月初到五月中旬開的花．對于花粉而言，要采用單核（單核居中到單核靠邊）期的花粉，為了鑒定該時期的花粉，常采用醋酸洋紅法進行染色鑒定．若是某些植物花粉細胞不易著色，常采用焙花青-鉻礬法法染色，能將花粉的細胞核染成藍黑色．
（5）分離、純化菌種時為得到單菌落，常用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種．

Answer 1

分析 1、PCR技術(shù)：
（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
（2）原理：DNA復制．
（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物．
（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．
2、純化微生物的方法
①平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面．
②稀釋涂布平板法：將駿業(yè)進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)．
3、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型．果醋制作的原理：
當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰�，再將乙醛變�(yōu)榇姿幔?br />4、測定亞硝酸鹽含量的原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標準顯色液目測比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量．

解答 解：（1）PCR技術(shù)的原理是DNA復制；每次循環(huán)需要經(jīng)過變性、復性、延伸三步．
（2）在果醋制作中，當糖源和氧氣充足時，醋酸菌能將糖分解成醋酸；在糖源不充足時，醋酸菌可以利用酒精生成醋酸，其化學反應(yīng)式為：C₂H₅OH+O₂→CH₃COOH+H₂O．
（3）在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色溶液．
（4）對月季來說，適宜花粉培養(yǎng)的時期是花粉應(yīng)處于單核期，因為單核期，細胞核由中央移向一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高，而且這個時期對離體刺激敏感，一般要通過鏡檢（顯微鏡觀察）來確定花粉是否處于合適的發(fā)育期，這時需要對花粉的細胞核進行染色，對于花粉細胞核不容易著色的植物常用的染色劑是焙花青-鉻礬溶液．
（5）分離、純化菌種時為得到單菌落，常用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種．
故答案為：
（1）DNA復制   變性  
（2）氧氣    C₂H₅OH+O₂→CH₃COOH+H₂O
（3）鹽酸酸化     重氮化       玫瑰紅
（4）單核（單核居中到單核靠邊） 焙花青-鉻礬法  藍黑 
（5）平板劃線  稀釋涂布平板

點評 本題綜合考查PCR技術(shù)、果酒和果醋的制作、植物組織培養(yǎng)、微生物的分離和培養(yǎng)等知識，要求考生識記PCR技術(shù)的原理及操作步驟；識記果酒和果醋制作的原理；識記植物組織培養(yǎng)的過程及注意事項；識記微生物接種常用的兩種方法及注意事項，能結(jié)合所學的知識準確答題，屬于考綱識記層次的考查．