Question

3．請分析回答下列有關現(xiàn)代生物科技方面的問題：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：第一步是目的基因的獲取，第二步是基因表達載體的構(gòu)建，第三步是將目的基因?qū)�入受體細胞，第四步是目的基因的檢測與鑒定．
①通常在第一步和第二步的操作中都需要的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）．
②利用PCR技術擴增目的基因的過程中，目的基因受熱形成單鏈并與引物結(jié)合，在熱穩(wěn)定性DNA聚合酶的作用下延伸形成DNA．
③采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入植物細胞后，培養(yǎng)該細胞再生成植株的過程中，往往需要使用植物激素，人為地控制脫分化和再分化過程．④蛋白質(zhì)工程的基本程序是：預期蛋白質(zhì)功能→設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列．
（2）請回答下列有關單克隆抗體制備的問題：
①與動物細胞融合過程相比，植物體細胞雜交在細胞融合之前要用纖維素酶和果膠酶處理．作用是去除細胞壁，誘導原生質(zhì)體融合的化學方法是用聚乙二醇．
②經(jīng)人工誘導后，骨髄痛細胞和產(chǎn)生免疫反應的動物的脾臟細胞中的B淋巴細胞融合．由于可能產(chǎn)生多種融合細胞，因此還需對融合細胞用選擇性培養(yǎng)基進行篩選，目的是選出雜交瘤細胞它的特點是既能迅速無限增殖，又能產(chǎn)生專一抗體．單克隆抗體的特點是特異性強、靈敏度高、并可大量制備．

Answer 1

分析 基因工程又叫DNA重組技術，是指按照人們的意愿，進行嚴格的設計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品．其基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構(gòu)建（核心）；③將目的基因?qū)�入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定．

解答 解：（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：第一步是目的基因的獲取，第二步是基因表達載體的構(gòu)建，第三步是將目的基因?qū)�入受體細胞，第四步是目的基因的檢測與表達．
①第一步是目的基因的獲取需要限制性核酸內(nèi)切酶切割；第二步是基因表達載體的構(gòu)建，需要限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和運載體，再用DNA連接酶連接，形成重組DNA．
②利用PCR技術擴增目的基因的過程中，目的基因受熱形成單鏈并與引物結(jié)合，在熱穩(wěn)定DNA聚合酶的作用下延伸形成DNA．
③采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入植物細胞后，培養(yǎng)該細胞再生成植株的過程中，往往需要使用植物激素，人為地控制細胞的脫分化、再分化．
④蛋白質(zhì)工程的基本原理是：預期蛋白質(zhì)功能→設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的序脫氧核苷酸．
（2）①植物體細胞雜交有植物組織培養(yǎng)過程和植物體細胞雜交過程．在細胞融合之前要用纖維素酶和果膠酶處理．作用是去除細胞壁，獲得原生質(zhì)體，再用物理、化學誘導原生質(zhì)體融合，常用的化學試劑用聚乙二醇．
②經(jīng)人工誘導后，骨髓瘤細胞和產(chǎn)生免疫反應的動物的脾臟細胞中的B淋巴細胞融合．由于可能產(chǎn)生多種融合細胞，因此還需對融合細胞進行篩選和檢測，用選擇性培養(yǎng)基進行篩選，目的是選出雜交瘤細胞，它的特點是既能迅速無限增殖，又能產(chǎn)生專一抗體．單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高、并可大量制備的特點．從而獲得符合要求的雜交細胞．
故答案為：
（1）目的基因的檢測與鑒定   ①限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）  ②熱穩(wěn)定性DNA聚合   ③脫分化    再分化 ④氨基酸     脫氧核苷酸
（2）①纖維素酶和果膠酶     細胞壁    聚乙二醇      ②選擇性培養(yǎng)基      雜交瘤細胞    既能迅速無限增殖，又能產(chǎn)生專一抗體  特異性強、靈敏度高、并可大量制備

點評 本題考查基因工程、蛋白質(zhì)工程和細胞工程的相關知識，重點考查基因工程和細胞工程的操作步驟，要求考生識記基因工程和細胞工程的操作步驟及相關操作中采用的方法和需要注意的細節(jié)，能結(jié)合所學的知識答題．