圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列,F(xiàn)有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列不正確的是( )
A. 圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖連接
B. 若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段,其產(chǎn)物長度為537bp、790bp、661bp
C.若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是MboI
D.在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后,為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加相應(yīng)抗生素的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
C
解析試題分析:
A項中,DNA單鏈中相鄰兩個堿基之間通過“脫氧核糖—磷酸—脫氧核糖”連接,正確;
B項中,Sma I識別的序列為CCCGGG,切割后會產(chǎn)生平末端;圖1所示的DNA分子中含有兩個Sma I的識別位點,第一個識別位點在左端534bp序列向右三個堿基對的位置;第二個識別位點在右端658bp序列向左三個堿基對的位置,從這兩個位點切割后產(chǎn)生的DNA片段長度分別為534+3,796-3-3,658+3,即得到的DNA片段長度分別為537bp、790bp和661bp,正確。
C項中,能夠獲取目的基因并切開質(zhì)粒的限制酶有識別序列為GGATCC的BamH I和識別序列為GATC的Mbo I,若使用Mbo I會同時破壞質(zhì)粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因,所以要用BamH I來切割目的基因和質(zhì)粒,切割后保留了完整的抗生素B抗性基因,便于篩選出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌。錯誤。
D項中,重組質(zhì)粒含有抗生素抗性基因,因此成功導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可以抗抗生素,因此一般需要用添加相應(yīng)抗生素的培養(yǎng)基進行篩選。正確。
考點:基因工程的操作程序
點評:本題有一定的難度,是一道高考題的變式,考查了學(xué)生的識圖能力、審題能力、理解能力。
科目:高中生物 來源:2012-2013學(xué)年廣東省執(zhí)信中學(xué)高二上學(xué)期期末考試理科生物試卷(帶解析) 題型:綜合題
(13分)圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列。現(xiàn)有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請回答下列問題:
(1)圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由______連接。
(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段,產(chǎn)生的末端是_______末端,其產(chǎn)物中有_____種不同的DNA片段。
(3)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段,用限制酶Sma Ⅰ完全切割,產(chǎn)物中共有_____種不同DNA片段。
(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是_________。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后,為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加_____的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
(5)假設(shè)D基因是抗棉鈴蟲的Bt毒蛋白基因,將D基因轉(zhuǎn)入棉花培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,如果__________________和_____________________,即可分別在分子水平和個體水平上說明抗蟲基因已成功表達。
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科目:高中生物 來源:2014屆福建廈門一中高二下期期中生物卷(解析版) 題型:綜合題
(12分)圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列,F(xiàn)有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請回答下列問題:
(1)若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段,產(chǎn)生的末端是 末端,其產(chǎn)物長度為 。
(2)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段,用限制酶Sma Ⅰ完全切割,產(chǎn)物中共有 種不同DNA片段。
(3)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是 。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后,為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加 的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。經(jīng)檢測,部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達,其最可能的原因是
。
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科目:高中生物 來源:2012-2013學(xué)年四川省南充市高三第一次高考適應(yīng)性考試生物試卷(解析版) 題型:綜合題
蘇云金桿菌是一種對昆蟲有毒害作用的細菌,其殺蟲活性物質(zhì)主要是一類伴孢晶體蛋白。伴孢晶體蛋白經(jīng)昆蟲腸液消化成毒性肽,并因此導(dǎo)致昆蟲死亡。自從培育轉(zhuǎn)基因植物抗蟲棉成功后,研究人員又試圖將抗蟲基因?qū)胨炯毎,從而培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻。研究人員從相關(guān)生物體內(nèi)提取出的部分物質(zhì)或結(jié)構(gòu)如下圖所示:圖1表示含有目的基因(抗蟲基因)的DWA片段長度(bp為堿基對)和部分堿基序列,圖2表示作為運載體的一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列,F(xiàn)有Msp I,BamH I,Mbo I ,Sma I 4種限制性核酸內(nèi)切酶,它們所識別的堿基序列和酶切位點(用“↓”表示)分別為C ↓CGG;G ↓ GATCC;n↓ GATC;CCC ↓ GGG。請回答下列問題:
(1)若用限制酶Sma I完全切割圖1中所示DNA片段,則其產(chǎn)物有______種,長度分別為______。
(2)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因通過同種限制酶處理后進行連接,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是______。
(3 )在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后,為了篩選出含重組質(zhì)粒的水稻細胞,需配置相應(yīng)培養(yǎng)基,其中添加的碳源是______,目的是提供營養(yǎng)和______。另外,培養(yǎng)基中除了含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外,一般還需要添加______(抗生素A/抗生素B),該培養(yǎng)基從用途上看屬于______培養(yǎng)基。
(4)在培養(yǎng)過程中,除必要的溫度、光照和氧氣等外界條件外,成功的另一個關(guān)鍵是操作過程必須保證無菌,鑷子等器械及培養(yǎng)基都可使用的滅菌方法是______。
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科目:高中生物 來源:2014屆廣東省高二上學(xué)期期末考試理科生物試卷(解析版) 題型:綜合題
(13分)圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列,F(xiàn)有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請回答下列問題:
(1)圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由______連接。
(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段,產(chǎn)生的末端是_______末端,其產(chǎn)物中有_____種不同的DNA片段。
(3)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段,用限制酶Sma Ⅰ完全切割,產(chǎn)物中共有_____種不同DNA片段。
(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是_________。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后,為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加_____的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
(5)假設(shè)D基因是抗棉鈴蟲的Bt毒蛋白基因,將D基因轉(zhuǎn)入棉花培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,如果__________________和_____________________,即可分別在分子水平和個體水平上說明抗蟲基因已成功表達。
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