Question

【題目】人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

(1)從______________中可獲取不具有啟動(dòng)子的htPA基因，再通過________技術(shù)使其數(shù)量大量增加。

(2)過程①需將 htPA基因與載體用________________切割后，再通過________________連接，來構(gòu)建____________________。

(3)過程②常用______________技術(shù)將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞中，受體細(xì)胞通常采用____________。

(4)為了在羊乳中獲取目的基因表達(dá)產(chǎn)物，還需要在目的基因的首端加上特殊的調(diào)控組件：_______________________。欲知羊乳中是否含有人組織纖溶酶原激活物，需使用_______________對(duì)其進(jìn)行檢驗(yàn)。

Answer 1

【答案】cDNA文庫（部分基因文庫） PCR 同種限制酶 DNA連接酶 基因表達(dá)載體 顯微注射 受精卵 乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子 相應(yīng)抗體

【解析】

據(jù)圖分析，①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，②表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，③表示早期胚胎培養(yǎng)，④表示胚胎移植，⑤表示妊娠分娩獲得轉(zhuǎn)基因母羊，⑥表示從分泌的羊乳中獲取htPA。

（1）從cDNA文庫中獲得的目的基因（htPA）是經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄獲得的，母羊啟動(dòng)子；利用PCR技術(shù)可以獲得大量的htPA基因。

（2）過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，先用同一種限制酶切割htPA基因與載體，在利用DNA連接酶將兩者連接起來構(gòu)成基因表達(dá)載體。

（3）②表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（動(dòng)物細(xì)胞），常用的受體細(xì)胞是受精卵，常用的方法是顯微注射法。

（4）根據(jù)題意分析，為了在羊乳中獲取目的基因表達(dá)產(chǎn)物，應(yīng)該將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子組合在一起；檢測(cè)目的基因的產(chǎn)物一般用抗原-抗體雜交技術(shù)，因此欲知羊乳中是否含有人組織纖溶酶原激活物，需使用相應(yīng)抗體對(duì)其進(jìn)行檢驗(yàn)。